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高考生物一轮复习考点解析学案:专题11.3 酶的研究与应用(解析版).doc
【2015高考考纲解读】
1.酶的存在与简单制作方法Ⅰ
2.酶活力测定的一般原理和方法Ⅰ
3.酶在食品制造和洗涤等方面的作用Ⅱ
4.制备和应用固定化酶Ⅰ【2014高考在线】
1.(2014·江苏卷)下列关于加酶洗衣粉的叙述,正确的是( )
A.高温易使酶失活,因此冷水洗涤去污效果应该比温水好
B.洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用
C.在pH低于7.0的自来水中,碱性蛋白酶依然能起作用
D.洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶在水里的污渍发挥作用
2.(2014·天津卷)嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
(1)PCR扩增bglB基因时,选用________________________基因组DNA作模板。
(2)下图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入________和______不同限制酶的识别序列。
注:图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同
(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为________________________________。
Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响
(4)据图1、2可知,80 ℃保温30分钟后,BglB酶会__________;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在________(单选)。
A.50 ℃ B.60 ℃ C.70 ℃ D.80 ℃
图1 温度对BglB酶活性的影响
图2 BglB酶的热稳定性
注:酶的热稳定性是酶在一定温度下,保温一段时间后通过其活性的保持程度来反映的
Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。
(5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获取热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中________(多选)。
A.仅针对bglB基因进行诱变
B.bglB基因产生了定向突变
C.bglB基因可快速累积突变
D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变
【答案】(1)嗜热土壤芽胞杆菌
(2)Nde Ⅰ BamHⅠ
(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶
(4)失活 B
(5)A、C
【解析】(1)bglB基因存在于嗜热土壤芽胞杆菌基因组中,故应以该菌的基因组DNA为模板进行基因扩增。
3.(2014·浙江卷)下面是关于固定化酶和细菌培养实验的问题。请回答:
(1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验,分组见下表。
组别 固定化酶柱长度(cm) 淀粉溶液的流速(mL·min-1) 甲 10 0.3 乙 10 0.5 丙 15 0.3 丁 15 0.5 将吸附了α-淀粉酶的石英砂装入柱中后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱,以除去____________。按上表分组,将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液进行KI-I2检测。若流出液呈红色,表明有____________生成;若各组呈现的颜色有显著差异,则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是____________组。
(2)下列关于上述固定化酶实验的叙述,错误的是( )
A.固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量
B.淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉
C.各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同
D.淀粉溶液的pH对实验结果有影响
(3)现有一份污水样品,某兴趣小组欲检测其中的细菌数,进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液,用____________法分别接种于固体平面培养基上,经培养后进行计数。该实验应注意,接种前,从盛有____________的容器中将玻璃刮刀取出,放在酒精灯火焰上灼烧,冷却后待用;分组时,需用______________作为对照。
(4)在上述细菌培养实验中进行计数时,应计数的是接种了( )
A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数
B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数
C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数
D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数
酶的研究与应用1.果胶酶与纤维素酶的比较
2.探究影响果胶酶活性的因素
(1)实验原则:对照原则、单一变量原则,严格控制变量,尽量减少无关变量的影响。
(2)实验原理:果胶酶活性受温度、pH和酶活性抑制剂的影响。在最适温度和最适pH时,酶的活性最高,果肉的出汁率、果汁的澄清度都与果胶酶的活性大小成正比。
(3)设
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