低分子量有机酸盐对矿物吸附Bt蛋白的影响.pdfVIP

低分子量有机酸盐对矿物吸附Bt蛋白的影响1 ** 付庆灵，董易君，胡红青 ，黄巧云 华中农业大学农业部亚热带农业资源与环境重点实验室，湖北武汉（430070 ） 摘 要：本文以高岭石(K) 、蒙脱石(M) 、针铁矿(G) 、二氧化硅(S)4 种矿物为材料，研究了 乙酸盐、草酸盐、柠檬酸盐等低分子量有机酸盐在不同浓度下对矿物吸附溶解态苏云金芽孢 杆菌 （Bt ）杀虫晶体蛋白和对吸附态Bt 蛋白解吸的影响，并用NaCl 和磷酸盐连续解吸矿物 吸附态蛋白，初步探讨了Bt 蛋白在矿物上吸附机制。结果表明，Bt 蛋白在矿物表面的等温 吸附曲线为 L 型，不同矿物的最大吸附量为蒙脱石针铁矿 高岭石二氧化硅。矿物对 Bt 蛋白的吸附量随有机酸盐浓度变化而变化，低浓度 （ 10mmol/L ）有机酸盐抑制高岭石、针 铁矿和二氧化硅吸附Bt 蛋白，而高浓度起促进作用，但草酸盐、柠檬酸盐抑制蒙脱石吸附 Bt 蛋白。低分子量有机酸盐对矿物吸附态Bt 蛋白的解吸能力较弱 （解吸率15% ），不同的 有机酸盐间差异不显著。Bt 蛋白部分以静电和配位方式吸附在矿物表面，而有机酸盐的存 在一定程度上增加矿物和蛋白间的静电吸附和配位吸附，草酸盐体系中71.7%-97.3%的蛋白 以静电和配位方式吸附，影响比其它有机酸盐的要大。 关键词：Bt 蛋白；有机酸盐；矿物；吸附；解吸 1. 前言 苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis, 简称 Bt ）杀虫晶体蛋白是在 Bt 芽孢形成过程 中产生的能导致多种昆虫死亡的毒蛋白，其中δ内毒素杀虫原理广泛应用于转基因抗虫植物 育种实践中。转 Bt 基因植物如转 Bt 玉米、水稻、马铃薯等生长期内可通过根系持续不断地 向环境释放Bt 杀虫毒素 （Saxena et al,1999, 2002; Stotzky, 2004 ），另外大部分含有毒素的秸 杆和根系遗弃到田间 （Palm et al, 1994；Donegan et al, 1995, 1996 ）。因此，随转 Bt 基因作物 的迅速发展和Bt 杀虫剂的广泛使用，高浓度的 Bt 毒素会以不同方式进入土壤中。 苏云金芽胞杆菌毒素是否会在环境中积累与以下三种因素有关：（1）使用的浓度；（2 ） 昆虫消耗的速度；（3 ）紫外光及土壤、作物表面微生物群对其钝化和降解的速度(Stotzky, 2000) 。而要了解毒蛋白进入土壤后是否会积累，关键要了解毒蛋白进入土壤后与土壤活性 颗粒之间的反应。纯化的 Bt 毒蛋白可被粘土矿物 （蒙脱石和高岭石）、腐殖酸和有机矿物聚 合体等土壤表面活性颗粒快速吸附，并与之紧密结合，但不会与粉粒和砂粒结合(Tapp et al,1994; Crecchio et al,1998, 2001; Venkateswerlu et al, 1992; Stotzky, 2000) 。毒素蛋白被土壤胶 体吸附后仍具有杀虫活性，毒性甚至比非结合态的还强(Tapp et al, 1995)，经红外光谱和X 射线衍射分析，吸附后毒素蛋白仅有微小的结构变化(Stotzky, 2000) 。毒素一旦被土壤颗粒 和胶体吸附，就会对微生物分解产生抗性，被吸附蛋白的杀虫活性可持续存在 180 天或 234 天(Saxena et al, 2002; Tapp et al, 1998 ) 。 土壤是一个复杂的生态系统，其中存在着低分子量有机酸盐、无机盐离子等配体。这些 配体大部分能与土壤有机、无机胶体表面发生作用，进而影响蛋白在土壤上的吸附－解吸行 为。目前这方面的研究较少，故本文研究了不同低分子量有机酸盐对 Bt 蛋白在矿物胶体表 面吸附解吸的影响，以及NaCl 、磷酸盐连续解吸存在有机酸盐时矿物吸附的 Bt 蛋白，这将 有助于深入研究 Bt 蛋白在土壤中的化学行为，阐明土壤—Bt 蛋白—有机酸盐的相互作用机 理。 2. 材料和方法 1基金课题：教育部高等学校博士学科点专项科研基金（20050504011）。 第一作者：付庆灵，1980 年生，湖北长阳人，在读博士生，已发表论文 5 篇。 ** 通讯作者。E-Mail: hqhu@ 。 -1-