Small hairpin RNA against Bcl-2 increases MTX-induced apoptosis in Raji cells.pdfVIP

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2017-09-01 发布于湖北
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Small hairpin RNA against Bcl-2 increases MTX-induced apoptosis in Raji cells.pdf

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hinese—GermanJournalofClinicalOncology December2009，Vo1．8，No．12，P709一P71 OI10．1007／s1033O一009—0176—6 SmallhairpinRNA againstBcl-2increases MTX-inducedapoptosisinRajicells木 BaoyingFang，DongmeiHe，YuanZhang，LiChen InstituteofHematology，MedicalCollegeofIinanUniversity，Guangzhou510632，China Received：26October2009／Revised：10November2009／Accepted：20November2009 Abstract Objective：TheaimoflhisstudywastostudytheeffeclofBcl一2sniaiIhairpinRNA(shRNA】enhancingmethotrex． atefMTX)．inducedapoptosisofRajicells．Methods：ExpressionplasmidwithBcl一2shRNAwaslransfectedintoRaiicellsby Lipofectmine2000andlhenlreatedwithMTX．At48hoflransfection．theexpressionIeveIofBc1．2mRNAandproteinwas evaluatedbyRT-PCRandimmunofloorescence．MTTassaywasusedtoanalyzeoclIproliferationaf24．48and72h．Apop． 1osiswasdetectedbyGiemsastainingandflowcytometriccelIcycleanalysis．Results：AftertransfectionwithBc1．2shRNA． 1heexpressionIevelsofBc1．2mRNAandproteinjnRajicellsdecreasedfP0．05)．UsingGiemsastaining．cellsfransfected withBcl一2shRNAcombinedwithMTXal48hdisplayedchangesofapoptosis．MTXsignificantlyinhibitedlhegro~hofcells afterlransfectedwithBcl一2shRNA(P0．05)．Apoptotic旧tesoftheRajicellslreatedwithBc1．2shRNAcombinedwithMTX significantlyincreased(P0．O5)．comparedwitheithercontroIshRNA／MTXcombinationorMTX-treatmentcellsalone．Con- ~lusion：OurresultssuggesllheshRNAagainslBcl一2mRNAoculdincreaseMTX-inducedapoptosisofRaiicells． Keyword Bcl2·：smallhairpinRNA(shRNA)；Rajicells；apoptosis；methotrexate(MTX) RNA interference (RNAi)，isaphenomenonwhere zationdrugsinlymphoma。 double—strandedsmallinterferingRNAfsiRNA)complexes cantargetatspecificgenes．A20一ntsiRNA islongenough Materialsandmethods toinduceRNAi1【】_ExpressionofBcl一2hasbeenobserved inthemajorityofhumancancerspecimensandcelllines． ReagentS Bcl——2proteinregulatesthemitochondria—．media