水稻条纹叶枯病毒RNA干扰载体构建及遗传转化.pdfVIP

山东农业科学20ll，2：l一6 ShandongA画cultu试Science8 水稻条纹叶枯病毒RNA干扰载体 的构建及遗传转化 李海青1’2”，柳 絮2…，李臻2，一，姚方印2，一，刘炜1，23． (1．山东师范大学生命科学学院，山东济南250014； 2．山东省农业科学院高新技术研究中心／山东省作物遗传改良与生物技术重点实验室，山东济南250100； 3．农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室，山东济南250100) 摘要：利用已知的水稻条纹叶枯病毒的序列设计了12对引物，利用这些引物经RT—PcR获得了5条 序列，经BLAsT分析，它们均与水稻基因组内的序列完全不匹配，可以用来作为干扰序列。将这5个序列构 建入由pUCl9改造的一段内含子两侧各含有一对同尾酶的干扰载体中，然后再将整个RNA干扰片段构建人 经改造的以玉米泛素ubi为启动子、以生物安全性的6口r基因为选择标记的植物双元表达载体pcAMBIAl300 中，经农杆菌介导对黄淮稻区主栽水稻品种圣稻13进行遗传转化。为抗条纹叶枯病水稻新品种的培育提供了 候选材料。 关键词：水稻条纹叶枯病毒；RNA干扰载体；Ubi启动子；6口r基因；抗病水稻品种 中图分类号：Q782文献标识号：A 文章编号：1001—4942(2011)02一0001—06 CoIlstructionandGeneticTransformationofRNAInterference VectorsfbrRice Virus Stripe u weil·2·3’ Hai—Qin91·2”，UUXu2”，Uzhen2”，YAOFang—Yin2”，UU (1．cof妇e矿￡咖Sc如脚，跳，I面增Ⅳo册越‰沁rs灯，五船，I250014，c^iM；2．日话内一‰^如删曲＆，蹴r， ‰础昭Ao诎彤旷Ag庇础H以＆如，嬲∥j匆蹦。麒o，y矿CroP＆删证，删啪孵鹏m肌d丑幻把c^，ID如盯， 曰阳讲眦讹f，M，lb打y矿Ag庇以t啪，五船厅250100，吼i加) AbstractTwelVeof were totheknown ofrice pairsprimers according sequencess试peVims， desi印ed arId rice were 5 wereobtainedRT—PCR．BLAST simiLar in sequences genome by By analysis，nosequences found t}lesefive couldbeusedastheinterference modified mtching sequences，∞tIley sequences．ApUCl9 Vectorinserteda asintronwit}Ia ofisocaud啪ersoneachsidewasusedast11einterl．erenceVec· f}agInent pair tor．觚er inted-erenceintotheinterf宅rencevector inted．erence in3ertir塔tlle sequences