微生物培养与应用(2课时).ppt

微生物的培养与应用 微生物基础知识 营养物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。 人及动物的营养物质： 水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。 植物的营养物质： 矿质元素、水、二氧化碳等三类。 微生物的营养物质： 水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。 选择培养基 消毒方法： （1）日常生活经常用到的是 消毒法； （2）对一些不耐高温的液体，则使用 消毒法 （3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒 等溶液以增强消毒效果，然后使用 进行物理消毒。 （4）实验操作者的双手使用 进行消毒； （5）饮水水源用 进行消毒。 灭菌方法： （1）接种环、接种针、试管口等使 灭菌法； （2）玻璃器皿、金属用具等使用 法，所用器械是 ； （3）培养基、无菌水等使用 灭菌法，所用器械是 。 （4）表面灭菌和空气灭菌等使用 灭菌法，所用器械是 。 5.菌种的保存 ①临时保藏方法 将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3～6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。 ② 长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 - 20℃下保存 测定微生物数量的方法： 1)直接计数法：最常用的显微镜直接计数。 优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：不能区分死菌和活菌； 难以计数微小的细菌。 一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。 2）间接计数法： 最常用稀释涂布平板计数法 应用：统计样品中活菌的数目 ②操作： a、设置重复组：增强实验的说服力和准确性。 空白对照： 指不做任何实验处理的对象组。 自身对照： 指实验与对照在同一对象上进行，即不另设对照组。 如“植物细胞质壁分离和复原”实验，就是典型的自身对照。 自身对照，方法简便，关键是要看清楚实验处理前后现象变化的差异，实验处理前的对象状况为对照组，实验处理后的对象变化则为实验组。 条件对照： 指虽给对象施以某种实验处理，但这种处理是作为对照意义的，或者说这种处理不是实验假设所给定的实验变量意义的。 例如，“动物激素饲喂小动物”实验，采用等组实验法，其实验设计方案是： 　　甲组：饲喂甲状腺激素（实验组）； 　　乙组：饲喂甲状腺抑制剂（条件对照组）； 　　丙组：不饲喂药剂（空白对照组）。 　　 相互对照： 指不另设对照组，而是几个实验组相互对比对照 . 如：探究温度对酶活性的影响 （一）筛选菌株 自然界筛选：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。(如耐高温的TaqDNA聚合酶) 实验室筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 1.原理： 尿素是一种重要的农业氮肥，只有当土壤中 的 细菌将尿素分解成氨之后，才能 被植物利用。尿素细菌能合成脲酶，在脲酶的作用下尿素被分解成氨。 CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 （2）实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。 （3）实验流程： 土壤取样 样品系列稀释 涂布平板与培养 观察并记录结果 （1）本实验所需培养基为 ，碳源为 。 （2）实验原理是