羧甲基茯苓多糖抗大鼠实验性肝纤维化作用的研究.pdfVIP

药 物 研 究 中 国 民 族 民 间 医 药 Themedicinestudy ChineseJournalofEthnomedicineandEthnopharmacy ·9 · 羧 甲基茯苓多糖抗大鼠实验性肝纤维化作用的研究 沈晓燕 胡 艳 周 维 张红卫 黄燕莉 唐志姣 侯安继 (1．上海市第七人民医院肿瘤科，上海 ，200137；2．武汉大学医学院实验中心，湖北，武汉 ，430071) 【摘要】 目的：肝纤维化是原发性肝癌(HCC)的重要中间环节，本文研究羧甲基茯苓多糖 (CMP)对实验性肝纤维化模型 大鼠肝组织病理形态及转化生长因子 (TGF31)的影响，探讨CMP抗肝纤维化的作用机制。方法：采用 sD大鼠，四氯化碳复合因 素法制作肝纤维化模型，采用 1％CMP灌 胃，以0．1％秋水仙碱作为阳性对照，光镜观察肝组织形态学变化，免疫组化法检测 TGF31。结果：与正常对照组比较，模型组大鼠肝组织呈现典型纤维化表现，TGF—B表达显著增强(P0．01)，CMP组与模型组 比较，肝组织纤维化明显减轻，TGF— 表达显著下降(P0．01)，显示了较好的抗纤维化、调节TGF—p表达的作用，CMP组与 秋水仙碱组无显著差异 (P0．05)。结论：CMP对肝纤维化大鼠模型肝组织细胞具有较好的保护作用，对 TGF—B表达具有明 显抑制作用 ，可能是其抗肝纤维化的主要机制之一。 【关键词】 羧甲基茯苓多糖；肝纤维化；TGF一岱；信号转导 【中图分类号】 R282．7 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007—8517(2009)22—00O9—02 肝纤维化(hepaticfibrosis)是慢性肝病迁延不愈，逐渐发 机制。我们利用大鼠肝纤维化模型，经羧甲基茯苓多糖预防 展至肝硬化 (hepaticcirrhosis)的中间阶段 ，以胶原蛋白(colla一 性用药后 ，观察肝纤维化大鼠肝组织病理形态学变化、肝组织 genprotein)为主的细胞外基质 (extracellularmatrix，ECM)合 中转化生长因子 B(TGFI3)的表达，及 CMP对上述变化的影 成与降解失衡，在肝脏内异常沉积，并导致肝细胞缺氧、坏死、 响 ，并以秋水仙碱为阳性对照，现报告如下。 再生、肝小叶改建 ，最终形成肝硬化甚至肝细胞癌 (hepatocel一 1 材料与方法 lularcarcinoma，HCC)。对肝纤维化形成机制的研究发现，肝 1．1 动物 清洁级健康 sD大鼠40只，雌雄各半，体重200 纤维化如未发展至肝硬化 阶段 ，经过恰当的治疗可被延缓或 一250g，由武汉大学实验动物中心提供。试验动物生产许可 逆转。但 目前临床上还缺乏安全有效的抗纤维化药物。 证号 ：SCXK(鄂)2003—2004，试验动物使用许可证号：SYXK 羧 甲基茯苓多糖 (CarboxychytlPachymaram，CMP)是中药 (鄂 )2003—2013，动物实验 一SPF级 ，繁殖供应 一SPF级。 茯苓的提取物，具有调节免疫、抗炎和抗衰老作用，我们前期 1．2 主要试剂 羧甲基茯苓多糖 (CMP)购自浙江省庆元县 工作已证实CMP具有体外抗乙型肝炎病毒 (hepatitisBvirus， 金源真菌多糖制品有限责任公司；秋水仙碱购 自武汉大学中 HBV)、上调树突状细胞 (Dc)功能等作用羧甲基茯苓多糖 临 南医院药学部；CCL4、橄榄油、胆固醇、无水乙醇购 自武汉科 床用于慢性乙型肝炎 (chronichepatitisB，CHB)和肝硬化 的 隆医药公司；兔抗大鼠TGF～B。多克隆抗体为Santercruz公 治疗取得一定效果，但作用机制不清。由于我们前期实验均 司产品；HistostainTM—PlusKits免疫组化染色试剂盒为美国 采用体外研究方法，研究结果能否推及体内还需要进一步的 ZYMED公司产品；其余试剂均购 自武汉科瑞生物技术公司。 在体研究加以证实。本研究中，我们在前期研究的基础上 ，进 1．3 主要仪器 RW2145轮转切片机为德国LEICA公司产 一 步探索羧甲