贵州香猪Noggin基因及其与BMP4基因的组织表达.pdf

贵州大学硕士论文 中文摘要 离得到后，人们对它的认识越来越清楚。Noggin是一种分泌蛋白，在动物 发育的早期到晚期都起着重要的调节作用。Noggin能使紫外线人工腹侧化 的爪蟾胚胎重新恢复背一腹的身体轴；在神经系统中诱导神经管的形成；减 弱包括骨形态发生蛋白在内的转化生长因子(TGF-beta)信号蛋白的活性， 从而控制骨的生长；调控生殖系统的发育。同时，Noggin的突变会引起机 体出现严重的疾病，如SYMI与SYNSI等。贵州榕江香猪身材矮小，是大白 猪等养殖品种的三分之一．本文以贵州榕江香猪为实验材料，设计二对特 异性的寡核苷酸引物，扩增了Noggin基因的上下两段序列，其长度分别为 537bp、541bp，连入T载体，转化大肠杆菌，菌落PCR、内切酶鉴定后，测 定阳性克隆子的碱基序列，拼接后得到香猪Noggin基因的完整序列。此序 列由896个碱基组成，不含内含子，碱基1-699为noggm基因的编码区， 700-896为基因的3‘非编码区。将香猪的noggin基因序列与人，鼠、兔、 鸡、青蛙、鱼的相应序列进行同源性分析，结果表明香猪noggin与人，鼠、 马、牛的同源性为93-97％，与鸡的同源性为82％，与鱼的同源性为54％，说 个氨基酸，前19个氨基酸为信号肽，后213个氨基酸为成熟肽。香猪noggin 与人、小鼠的有4个氨基酸不同，其氨基酸同源性为98．7％，香猪成熟肽第 99和112位的氨基酸改变使noggin蛋白的二级和三级结构出现明显改变， 其位置位于蛋白的表面，因此可能影响noggin与其它调控因子的结合。 显示，Noggin在大脑、卵巢、子宫中表达，其中大脑的表达量显著高于卵 巢和子宫组织(P0．05)；脾、肺、脊髓、肝、肾等组织中未检测到Noggin 基因的表达，对脑、子宫和卵巢检测出的194bpc0NA片段进行测序后，证 实表达的片段确为Noggin基因。BMP4在大脑、卵巢、子宫、脾、肺、肝、 在脑、子宫和卵巢的表达量相当，位脾、肺、肝、肾中仅检测到BMP4的表 贵州大学硕士论文 达，而且其表达量明显高于脑、子宫和卵巢，提示在这些组织中由于拮抗 巢和子宫的生长发育和功能，但在脾、肺、肝、肾等组织中以BMP4的直 接调控作用为主．本文的研究对香猪生长发育的调控机制研究，对香猪的 合理开发利用具有重要的意义。 关键词：Noggin；BMP4；组织表达；香猪 2 贵州大学硕士论文 of andthetissue of and Cloningnoggingene expressionnoggin BMP4in from County Xiangpig Rongjiang Abstract showsmoreandmore tothe ofthe regnlatation Noggin important growth and in isnsecreted which developmentanimal．Noggin polypeptide functionsbothin andlater canmake early developmentstage．Noggin restorenormaldorsal—ventralaxisthatha