统计学方法优化麦麸发酵产木聚糖酶条件的研究.pdfVIP

2009年 5月 中国粮油学报 VoI．24．No．5 第24卷第5期 JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociation Mag2009 统计学方法优化麦麸发酵产木聚糖酶条件的研究 刘玲玲 陈 钧 (江苏大学食品与生物工程学院，镇江 212013) 摘 要 以纳豆芽孢杆菌JSU一15为供试菌株，麦麸皮为唯一固体发酵基质，运用统计学方法对其产木 聚糖酶的条件进行优化。首先用 24—1部分因子实验设计对影响木聚糖酶活性的主要变量进行了评价，发现 主要影响因子为粒径和发酵时间。然后用最陡爬坡实验设计确定主要变量的最佳水平。最佳产酶发酵条件 为：粒径为0．4lain、麸皮与水的比例为 1：5．6、接种量为 3mL和发酵时间为 50h。在最佳产酶条件下进行发 酵，木聚糖酶活力达367U／g麦麸，比未优化前提高了2．1倍。 关键词 木聚糖酶 纳豆芽孢杆菌JsU一15 统计试验设计 中图分类号：TS201．3 文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2009}05—0107—03 麦麸皮是我国大宗农副产品资源，估计年产量 本研究利用统计学方法对纳豆芽孢杆菌 JsU— 2000万吨。目前主要用作饲料，但其作为饲料组分 l5的产酶条件进行了优化，并确定了最佳发酵条件。 的经济价值 已经下降…1。主要原因在于其中含有 20％～30％的阿拉伯木聚糖_2J，阻止了肠道的消化利 l 材料与方法 用，降低了麦麸皮的利用价值。阿拉伯木聚糖主要 1．1 菌种与材料 是通过提高消化道食糜黏度而产生抗营养作用。 纳豆芽胞杆菌JSu一15，由江苏大学食品与生物 木聚糖酶是木 聚糖 降解 酶系 中最关键 的 工程学院分离保存。 酶_3-4]，广泛应用于造纸、食品、饲料、生物转化等行 麦麸皮，购于镇江市场；燕麦木聚糖：美国Sigma 业。近几十年来，木聚糖酶的应用潜力一直为众多 公司；其他试剂均为国产分析纯。 的研究者所关注。饲料中添加木聚糖酶，可显著降 1．2 方法 低阿拉伯木聚糖分子的大小，从而消除或降低消化 1．2．1 接种物的制备 道中的食糜黏度，提高动物 内源性消化酶的活性，促 从斜面上取一环菌种接种到30mL普通肉汤培 进营养物质的消化吸收。此外，木聚糖的酶解产物 养基中，37cC、160r／min的条件下震荡培养 12h。 低聚木糖还具有调节动物肠道微生态环境、降低动 1．2．2 固体基质发酵 物结肠炎的发生率和减少抗生素等兽药用量的功 麦麸经标准分样筛 6、10、12、16、18、24目和 45 效，使动物生产性能进一步提高。 目过筛后，获得 3、2、1．6、1．2、1、0．8和0．4II咖 的平 从纳豆中筛选到 1株耐高温、木聚糖酶活性较 均粒径。对所有试验设计，发酵均在 250mL锥形瓶 高的菌株——纳豆芽孢杆菌JSU一15。利用该菌为 中进行，每瓶装 5g麦麸，加入一定 比例 的水后， 出发菌株，麦麸皮为唯一发酵基质，对其发酵产木聚 121oC高压灭菌45min。冷却至室温后接种，37℃培 糖酶的条件进行了优化。通过生物工程手段、利用 养。 廉价的麦麸皮生产木聚糖酶，既能降低成本，又能提 1．2．3 木聚糖酶粗酶液的获得 高麦麸皮的附加值。并且，利用 固体基质发酵制备 发酵后产物用 25mL磷酸缓冲液(pH7．O)抽提， 的木聚糖酶或者直接通过纳豆芽孢杆菌 JSu一15在 置于2