金纳米粒子自聚集和恒温指数扩增法高灵敏检测DNA和MicroRNA.pdfVIP

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2017-09-01 发布于安徽
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金纳米粒子自聚集和恒温指数扩增法高灵敏检测DNA和MicroRNA.pdf

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摘要摘要本论文研究了纳米金的自聚集现象，即当溶液中盐浓度达到一定浓度时，标记了 DNA 链的纳米金就会发生自聚集现象，并伴随着颜色变化，加入与其标记 DNA 相匹配的目标 DNA 链，通过 DNA 杂交，聚集就会被阻止。利用这种纳米金自聚集现象，可以实现目标 DNA 链的灵敏检测。这种检测方法非常适合与恒温指数扩增反应相结合，通过检测扩增产物，实现 DNA 的高灵敏度可视性检测。在进一步的研究中，我们发现 microRNA （miRNA ）也能作为引物启动恒温指数扩增反应，结合纳米金自聚集方法检测扩增产物，建立了操作简便、快速、高灵敏度分析 miRNA 的方法。此方法能检测到 fmol/L 水平的 miRNA 。关键词金纳米粒子自聚集 DNA 检测 MicroRNA I Abstract Abstract A new self-aggregation phenomenon of single strand DNA-modified gold nanoparticles (ssDNA-GNPs) is demonstrated. The self-aggregation can be prevented by hybridization between the ssDNA on GNPs and the complementary DNA. Thus, the self-aggregation of ssDNA-GNPs can be conveniently applied to sensitive DNA detection by visualization of color changes. The self-aggregation-based method for DNA detection is ideally suited to couple with the isothermal exponential DNA amplification reaction (EXPAR) for highly sensitive detection of DNA. We have further demonstrated that microRNAs are well suited for triggering the EXPAR reaction. Combining the simple, visual self-aggregation-based detection with the rapid, isothermal EXPAR reaction, it can detect microRNA at fmol/L level. Key words gold nanoparticles self-aggregation DNA detection microRNA II 第 1 章引言第 1 章引言 1.1 纳米粒子探针在 DNA 杂交分析中的应用 1.1.1 纳米粒子概述纳米粒子(Nanoparticles) 是指粒径在 1~100 nm范围内的粒子,其尺寸介于原子、