ESR和CLSM技术用于促渗剂作用机制及亲水性大分子跨鼻黏膜转运途径的研究.pdfVIP

维普资讯 药学学报 ActaPharmaceuticaSinica2007，42(11)：1195—1200 ·ll95· ESR和 CLSM 技术用于促渗剂作用机制及亲水性 大分子跨鼻黏膜转运途径的研究 张玉杰h，张 强 ，杨 洁 ，孙明杰 ，王筱亮 ，陈明霞 ，汪 祺 ，‘姜 昊 ‘ (1．北京中医药大学 中药学院，北京 100102；2．北京大学 药学院，北京 100083； 3．中国中医科学 院 基础理论研究所 ，北京 100700) 摘要 ：采用电子 白旋共振 (ESR)和共聚焦激光扫描显微镜 (CLSM)技术研究促渗剂作用机制及促渗剂对亲水性 大分子跨鼻黏膜转运途径的影响。比较重组水蛭素-2(rHV2)与促渗剂联合鼻腔用药前后大 鼠的生物利用度 ；采用 以5一嗯唑烷氮氧 自由基硬脂酸、l6一嗯唑烷氮氧 自由基硬脂酸和马来酰亚胺作为 白旋标记物的电子 白旋共振技术 ，考 察促渗剂对家兔鼻黏膜脂质和蛋 白的影响；采用共聚焦显微镜光学切片结合荧光探针标记技术探讨促渗剂对大 鼠 鼻黏膜上皮细胞骨架肌动蛋 白的作用 ，同时观察在各种促渗剂作用下 rHV2的转运途径 。壳聚糖 (chitosan，CS)，羟 丙基 -环糊精 (hydroxyl-propyl-beta-cyclodextrin，HP 一CD)，甘草酸单胺盐 (ammonium glycyrrhizinate，AMGZ)均 能显 著改善 rHV2的鼻黏膜吸收；CS主要通过细胞旁路途径增加 rHV2鼻黏膜转运 ，这一结果可能与其对细胞骨架肌动 蛋 白微丝 的影响从而打开细胞 间紧密连接有关；HP1B-CD可同时增加跨细胞和经细胞旁路两种途径的转运 ，可能与 其既能改变膜质流动性又能影响膜蛋白构象的特性有关 ；AMGZ主要增加亲水性大分子跨细胞途径 的转运 ，实验观 察到其对膜蛋 白有作用 ，但未观察到其对膜质 的作用 ，确切的机制 尚有待研究。本实验可为促渗剂及亲水大分子跨 细胞膜转运途径 的研究提供借鉴。 关键词：促渗剂 ；亲水性大分子 ；电子 白旋共振 ；共聚焦激光扫描显微镜 ；促渗机制 ；鼻黏膜 ；转运途径 中圈分类号 ：R943 文献标识码 ：A 文章编号 ：05l3—4870(2007)ll—l195—06 Promotingmechanism ofenhancersand transportpathway oflargehydrophilicmolecularacrossnasalepithelium studiedby ESR andCLSM technologies ZHANGYu—jie ，ZHANGQiang，YANGJie，SUNMing—jie，WANGXiao—liang， CHENMing—xia，WANGQi，JIANGHao (，．SchoolofChineseMaterialMedica，BeltingUniversityofChineseMedicine，Beng100102，China； 2．SchoolofPharmaceuticalSciences，PekingUniversity，Beijing100083，China； 3．InstituteofBasicalChineseMedicalTheory，ChinaAcademyof TraditionalChineseMedicine，Bering100700，China) Abstract：Theaim ofthisstudy isto investigate absorption—promotingmechanism ofenhancersand thetransportpathwayoflargehydrophilousmolecularacrossratnasalepithelium byelectronspinresonance (ESR)andeonfoeallaserscanningmicroscopy (CLSM)technologies．Intheexperiment，reco