公猪精液PRRSV变异株检测及NSP2、ORF5基因序列分析.pdfVIP

第3O卷 第2期 华南农业大学学报 Vo1．30．No．2 2009年4月 J0uma1ofSouthChinaAg—cultumlUniversity Apr．2009 公猪精液 PRRSV变异株检测及 NSP2、 ORF5基 因序列分析 王连想 ，孙彦伟 ，马静云 ，张冠群 ，谢青梅 ，陈 锋 ，毕英佐 ，于康震 (1广东省动物防疫监督总所，广东广州51023O；2华南农业大学动物科学学院， 广东广州51O642；3中国兽医药品监察所，北京 10oo81) 摘要：用荧光 RT．PcR方法从某猪场精液 中检测到猪繁殖与呼吸综合征病毒 (Porcinerepr0ductiveaIldrespimtory syndr0mevims，PRRSV)变异株(NsP21594～168Obp缺失)核酸阳性．提取 1份阳性样品病毒核酸测定和分析其 NsP2和ORF5全基因序列，结果表明NsP2基因由950个氨基酸组成，与cH一1a、VR_2332等经典 PRRsV相比481 位缺失1个氨基酸、532～56O位连续缺失29个氨基酸 ，与J)认1、HuN4等毒株具有相同的缺失特性 ；ORF5基因第 13、151位为具有强毒特性的精氨酸(R)，存在4个潜在的糖基化位点，分别位于3O～32、35～37、44～46和51～53 位氨基酸．遗传进化分析表明，测定序列与Jx．A1、HuN4等毒株关系最近，与 cH·la、NVsL等同属一个大分支，而 与BJ．4、P129、RespPRRsMLV、VR-2332等处于不同分支．研究证实公猪精液可携带 PRRsV变异株 ，因此猪场 (群)在人工授精和引进精液时必须强化检疫和生物安全措施． 关键词：精液；猪繁殖呼吸综合征病毒；变异株；NsP2基因；0RF5基因 中图分类号：S852．65 文献标识码 ：A 文章编号：l001．411x(2oo9)02—01o9—03 Detecti0n0fPRRSV VariantStrain inB0arSemen 蜀md SequenceAnalysis0fNSP2andoRF5Genes WANG Lian—xiang ，SUN Yan—wei，MA Jing—yun ，ZHANGGuan—qun， xIEQing．mei，CHENFeng2，BIYing—zuo2，YUKang—zhen。 (1Guangd0ngPmvinc InstituteofAnimalPreve onandSupeHision，GuaIlgzhou5l0230，China； 2CoUege0fAnimalScience，SoutIlCllinaAgrictl1turalUniversity，Guan铲h0u51O642，Cllina； 3C}IinaInstitute0fVeterinaryDmgContml，Beijing10oO81，ClIina) Abstract：Porcinerepr0ductiveandrespirat0rysyndr0mevirus(PRRSV)variantstrains(NSP21594— 1680deletion)wereidentifiedbyreal—timeRT—PCRf_mmbo￡Lrsemenofapigfm．cDNAofNSP2and ORF5genesof0nestrainnamedGD，rSwereclonedandsequenced． eresultsshowedthatNSP2gene wascomp0sedof95Oaminoacids，whichhad1aminoacidde1etionatthepositions0f481and29啪 ino acidsdeletionatthep0sitionsof532_560comparedwit王1tl1atofCH—laaIld