重金属诱导拟南芥原生质体DNA 损伤单细胞凝胶电泳检测.pdfVIP

植物学报Chinese Bulletin of Botany 2009, 44 (1): 117 123, w w w .chinbullbotany .com .技术方法. 重金属诱导拟南芥原生质体DNA 损伤的 单细胞凝胶电泳检测 1 1, 2 1* 聂志刚 , 王艳 , 李韶山 1 华南师范大学生命科学学院, 广东省高等学校生态与环境科学重点实验室, 广州5 10631 2 暨南大学理工学院, 广州5 10632 摘要 以拟南芥原生质体为实验体系, 研究不同浓度的3种重金属离子对拟南芥原生质体的毒性和DNA损伤的差异。结果表 - 1 2+ 2+ 2+ . 明, 用1-5 mmo l L 的Zn 、Cd 和Cu 分别处理的拟南芥原生质体, 2 小时内活力逐渐下降, 并表现出明显的浓度依赖性; 与相同浓度的Cd 2+ 和Cu2+ 相比,Z n2+对拟南芥原生质体活力的影响程度较小, 表现出较低的毒性。单细胞凝胶电泳检测发现, - 1 2+ 2+ 2+ . 用0.1-0.8 mm ol L 的Z n 、C d 和C u 分别处理拟南芥原生质体3 0 分钟, 以OTM值表示的原生质体D NA损伤量随重金 - 1 2+ 2+ 2+ . 属离子浓度的增加而递增; 相同浓度(0.5 mmol L )的3种重金属离子相比, Zn 对原生质体的遗传毒性明显低于Cu 和Cd 。 综合原生质体活力和DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测结果, 发现Zn2+对拟南芥原生质体的遗传毒性较低, 而Cd 2+ 和Cu2+ 的遗 传毒性较高。本研究建立的拟南芥原生质体实验体系, 结合运用单细胞凝胶电泳技术, 能够快速、灵敏地检测重金属对植物 细胞的遗传毒性。 关键词 拟南芥, 彗星试验, DNA 损伤, 重金属, 原生质体, 单细胞凝胶电泳 聂志刚, 王艳, 李韶山 (2009). 重金属诱导拟南芥原生质体DNA 损伤的单细胞凝胶电泳检测. 植物学报44 , 117 12 3. 随着人类活动的不断增加和工农业的迅速发展, 重 2003; Sag i and Fluhr, 2006), 对细胞内的蛋白质分子、 金属在环境中的释放严重污染了农田和河流等与人类息 DNA 和脂质等生物大分子造成损害, 严重时将导致细 息相关的生态系统。重金属被植物吸收后, 通过食物链 胞死亡。G ic h n er 等( 20 0 6) 报道, 在被重金属污染 进入动物体或人体, 影响动物的生长发育, 并严重危害人 的土壤中, 烟草和番茄植株叶片细胞核 D NA 损伤明 类身体健康。 显高于对照。 植物在受到重金属污染时通常会表现出光合作用受 单细胞凝胶电泳(s ingle cell gel elec trophoresis, 到抑制、叶绿素含量降低、生物量减少、生长迟缓、 SCGE)又称彗星试验(comet assay)是近年来发展起来 植株矮小和根系伸长受抑制直至停止, 严重时甚至导致 的可以在细胞水平检测真核细胞DNA 损伤的一种遗传 作物产量和品质的降低及植物体死亡。植物对重金属 毒理分析技术, 具有简便、快速、灵敏、样品用量少 的抗性及其细胞和分子机理研究, 已