人乳腺癌细胞系经诱导分化后差异表达基因的初步研究.pdfVIP

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2017-09-01 发布于安徽
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人乳腺癌细胞系经诱导分化后差异表达基因的初步研究.pdf

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南日_K.大学石泣二卜学 1立论文 PreliminaryStudyofDifferentialE冲ressedGeneinMCF-7Cell LineTreatedbyall-transRetinoicAcid Graduate:XingDe-yin Department:ClinicalMedicine Supervisor:FengYu-mei MaoHui-sheng LiuHong-yin Abstract Objective:DevelopmRNAdifferentialdisplaypolymerasechainreaction(DD-PCR)method withsilverstaining;StudytheeffectofinduceddifferentiationinbreastcancercelllineMCF-7 treatedbyall-transretinoicacidandisolatedifferentiation-relativegenes. Methods:TotalRNAareextractedfromMCF-7celllinetreatedbyall-transretinoicacidandcontrol ones.Afterreversetranscriptionreaction,cDNAsareamplifiedbyDD-PCRusingthreeanchored primersandfourarbitraryprimers.TheDNAbandsonpolyacrylamidegelsaredisplayedbysilver stainmethod,thenthedifferentialdisplayedDNAbandsarevisually recovered fromgelsand reamplifiedbyPCR.Reamplifiedproductsareoftenamixtureofsimilarsize,whicharedeterminedby single-strandconformationpolymorphisms(SSCP)gels. Results:Thereareobviousdifferencesincharacterizationofcellbiologyandgeneexpressionbetween humanbreastcancercelllinesMCF-7beforeandafterall-transretinoicacidtreatment.SeveralcDNA fragmentsexpressedaftertreatmentareisolated,oneofwhichis313bpsizeandhasbeendetermined bySSCPgels. Conclusion:l.Thedevelopednon-radioactivedifferentialdisplaytechniquewithsilverstainingisa simple,sensitiveandefficientmethodforisolatingdifferentialexpressedgene;2.AI]-transretinoicacid playsanimportantroleinregulatingthedifferentiation-relatedgeneexpression.Investigatingthis processwillhelpustoexplainthemechanismofinduceddifferentiation. Mesh:BreastCarcinoma Differentiation RetinoicAcid RNA,messenger 2 洲片升大 Ait书目弓 Ar.气立舌仑文