人神经干细胞的体外生长特性及SCF在脑发育中的表达.pdfVIP

盔拦匡叠厶堂鲤．』：班红尘熊塞 ：l!竖地些 人神经干细胞的体外生长特性及 SCF在脑发育中的表达 摘要 本实验利用有丝分裂因子，体外诱导生成人神经于细胞 生长特性，并研究了甲状腺激素(TH)和视黄酸(RA)对Je分 龄10．22周的人脑半球，分散组l|J也后接利一于添加农皮生LCzl人l uM)。诱导分化时，撤除有 时添加甲状腺激素(T，，30ng／m1)或视黄酸(RA，O．5 丝分裂因子的作用，并将细胞种植于涂有基质的培养板中。采用自然分化以 及L或RA诱导的方法，并利用免疫组织化学方法鉴定分化后的细胞类型。 同时，进行细胞克隆分析、传代培养、端粒酶活性检测及观察RA诱导的凋 殖能力，可连续传代而不丢失其增殖和多分化潜能的干细胞特性。(3)撤除 EGF和bFGF后，细胞停止分裂，并分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶 具有向神经元分化的潜能。(4)克隆分析显示NSC生长呈密度依赖性(密度 1：m少突胶 表达的端粒酶活性较低，j{：随培养时问延长而下稠。(6)T，订lUJ 质细胞方向发展，RA促进神经元的产生并具有诱导NSC凋亡的作_¨=j。 SCF是一一种多功能的多肽因子，其受体jI{原癌基闲c—kit编码，在配r发 2 态洼匿挝厶堂塑I二型[毪：!：逢竖 !l!竖』j耋i坚 体外培养的人NSC中SCF／c．kit mRNA的表达情况。结果显示，在大脑、小 脑、海马、脑干、延髓、纹状体和垂体均见SCF／c—kit基因表达。除检测到 脑中占主要部分的可溶性片段外，还见一约750bp的未知片段，估计与发育 过程中发生SCF的剪接变异有关，其生理意义还不明确。在体外培养的NSC qt 各因素作用组之间无明显差异。SCF／c．kit在体内孤体外的表达提示这一配基／ V 受体信号系统在脑发育中具有一定的生理功能。) ／ 总之，NSC的生长，分化受内外源因素的调节，相关的机制还有待I酬明。 本实验所建立的人NSC可作为研究CNS发育机制的体外模型，并可进行细 胞移植和基因转移以替代受损的脑细胞和治疗神经变性疾病。 7 关键讯黧?胞’表皮生长因子’碱峨纤笋长因子’“啾腺激素 视黄酸 ] 叁攫邕登厶鲎亟±婴筮堡逾塞 墓奎趟噩 The characteristicofHumanNeural StemCells growth inVitro and of SCFinBrain Expression Development Abstra