食品中常见防腐剂的毛细管电泳分离检测.docVIP

食品中人工合成色素的毛细管电泳分离检测研究( 蒋奕修 谢天尧* （中山大学化学与化学工程学院分析化学研究所, 广东 广州 510275） 摘要 建立了毛细管电泳/电导法分离检测食品中人工合成色素柠檬黄和日落黄的分析新方法. 采用CZE模式, 以未涂层融硅石英毛细管（50cm×50μm）为分离柱, 10mmol/LTris+10mmol/LH3BO3+0.2mmol/LEDTA+0.2%四乙烯五胺为电泳运行液, 分离电压-15.0kV, 柠檬黄和日落黄在11分钟内获得基线分离. 检出限分别为9.8×10－7mol/L和1.1×10-7mol/L. 应用于市售饮料中柠檬黄和日落黄的测定, 取得满意结果. 关键词 毛细管电泳, 电导检测, 食品分析, 合成色素, 柠檬黄, 日落黄 1 前言 在食品中添加着色剂是为了改善食品的色泽, 增加人们的食欲, 同时也为了提高其价值, 食品着色剂可分为天然色素和人工合成色素, 人工合成色素色泽艳丽, 不易褪色, 价格低廉. 食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化工产品为原料, 经过磺化、硝化、偶氮化等一系列有机反应化合而成, 有的还含有β-萘胺和α-氨基萘酚等致癌物. 近年来, 某些作为食品添加剂的合成色素已证实具有慢性毒性, 可以导致生育力下降、畸胎等.有些色素在人体内可能转换成致癌物质.例如, 人造奶油着色的奶油黄, 已被证实可以导致人和动物患上肝癌, 而其它种类的合成色素如橙黄能导致皮下肉瘤、肝癌、肠癌和恶性淋巴癌等.目前国际国内的食品安全监督机构已出台了相应的法规来严格控制其使用范围和使用量.我国准许使用的人工合成色素有11种.“苏丹红”事件的爆发, 正是国际社会对食品安全问题高度重视的结果[1-4]. 因此/电导检测, 以10mmol/LTris+10mmol/LH3BO3+0.2mmol/LEDTA+0.2%四乙烯五胺为电泳介质,CZE分离模式 建立了同时测定日落黄、柠檬黄2种常见的人工合成色素（结构式如图1所示）的分离分析新方法, 具有快速、简便的优点, 并应用于市售饮料中上述成分的检测, 取得较满意的结果. (a) (b) 图1 柠檬黄和日落黄的分子结构图 a:柠檬黄 b:日落黄 2　实验部分 2.1　实验仪器和试剂 CES2003型毛细管电泳仪（高压电源、电导监测器、毛细管电泳数据工作站, 中山大学化学与化工学院研制）, 石英毛细管（50μm×50μm i.d. 河北永年光导纤维厂）, CQ－2B型超声波清洗器（明珠电器有限公司）, pHS-3C型酸度计（上海伟业仪器厂）. 三羟甲基氨基甲烷(Tris, 北京鼎国生物技术有限责任公司, 生化试剂), 硼酸（广州试剂一厂）, 四乙烯五胺（TEPA, 汕头市光华化学厂）, 乙二胺四乙酸（EDTA, 汕头市化学试剂厂）, 所用试剂除注明外均为分析纯, 水为超纯水. 2.2　缓冲溶液和标准溶液的配制 分别配制0.1mol/LH3BO3溶液储备液, 20%的四乙烯五胺水溶液, Tris和EDTA配成浓度分别为0.5mol/L与0.01mol/L混合溶液.实验时, 按比例各取适量以配成不同浓度电泳运行缓冲液. 柠檬黄和日落黄标准品均分别配成1×10-3mol/L的储备标准液. 2.3　实验方法 连接好毛细管电泳仪和检测装置, 毛细管柱在使用前依次用0.1mol/LNaOH、蒸馏水和电泳运行液各冲洗约5min.电化学检测池体和检测电极用超声波进行清洗.（更换运行液时需按上述步骤清洗毛细管和电极）. 以10mmol/LTris+10mmol/LH3BO3+0.2mmol/LEDTA+0.2% TEPA为电泳缓冲体系为电泳运行液, 采用电动进样, 进样电压为－10.0kV, 时间为5ｓ, 分离电压为－15.0kV.电导检测器的输出信号经数据工作站采集到微机中进行实时数据处理、图形显示和数据文件存储.在室温(25℃)、湿度＜70％的条件下进行. 2.4 样品处理和配制 样品加热除去CO2后, 加入0.6mol/LTris调节样品的pH值为8.0, 再经过0.22μｍ微孔滤膜过滤后, 待测. 3　结果与讨论 3.1　缓冲体系及其浓度的选择 电导检测器输出的分析信号来自待测组分的电导值与缓冲溶液背景电导的差值, 因此需要考虑到缓冲溶液的背景电导的影响, 通过选择合适的缓冲溶液浓度以获得最佳的灵敏度、信噪比和良好的分离度.分别试验了Tris－H3BO3、Tris－H3BO3－CTAB、Tris－HAc－TEPA、Ci