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课时提升作业(三十九)
(30分钟 50分)
一、选择题(包括6小题,每小题4分,共24分)
1.(2013·淮南模拟)多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历30多次下述循环:95℃条件下使模板DNA变性、解链→55℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述,不正确的是( )
A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸
D.PCR与细胞内DNA复制相比,其所需要酶的最适温度较高
2.试分析下图中,与用海藻酸钠作载体制备固定化酵母细胞相似的是( )
3.(2013·安庆模拟)PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程。下列说法错误的是( )
A.A过程高温使DNA变性解旋,该过程不需要解旋酶的作用
B.C过程要用到的酶在高温下失活,因此在PCR扩增时需要再添加
C.如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95℃→55℃→72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%
D.PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变
4.(2013·马鞍山模拟)PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是( )
①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA
②PCR过程不需要DNA聚合酶
③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的
④PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制
A.③④ B.①② C.①③ D.②④
5.在用凝胶电泳法分离蛋白质时,一定要加入缓冲溶液,其作用主要是( )
A.释放血红蛋白
B.使蛋白质的活性增高
C.维持蛋白质所带的电荷
D.使蛋白质带上电荷
6.(2013·南京模拟)如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置。下列相关叙述正确的是( )
A.血红蛋白在红细胞中的作用体现了蛋白质具有调节功能
B.甲装置中A是蒸馏水,乙装置中C溶液的作用是洗脱血红蛋白
C.甲装置的目的是去除样品中相对分子质量较大的杂质
D.乙装置分离时,待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液
二、非选择题(共26分)
7.右图是固定化酶反应柱,请回答下列问题。
(1)将α-淀粉酶溶于水中,再加入石英砂,不时搅拌,这样α-淀粉酶就固定在了石英砂上。这种固定化的方法称为 。30 min后,装入如图所示的反应器中,构成固定化酶反应柱,并用10倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱,洗涤的目的是 。洗涤时,蒸馏水流速 (填“能”或“不能”)过快。
(2)实验时,将此反应柱固定在支架上,用滴管滴加可溶性淀粉溶液,并以
0.3 mL/min的流速过柱,控制流速的目的是 。在流出
5 mL后接收0.5 mL流出液,加入1~2滴 溶液,观察颜色。为了使观察到的颜色变化明显,可 后再观察。如果溶液呈红色,说明淀粉水解成为 。
(3)实验后,用10倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱,洗涤的目的是 。洗涤后,放置在4℃冰箱中保存。几天后,可重复使用。
(4)一段时间后,某同学从冰箱中取出此反应柱,重复上述实验,却没有了相同的结果,试分析可能的原因: 。
答案解析
1.【解析】选C。破坏DNA分子内碱基对之间的氢键可利用热变性或解旋酶实现;复性过程中温度降低,引物通过碱基互补配对与模板链结合;延伸过程中需要DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸,不需要ATP;PCR中使用的Taq DNA聚合酶最适温度为72℃,温度较高。
2.【解析】选D。本题考查了固定化细胞的方法。A是吸附法,常用于将酶固定;B是化学结合法,多用于酶的固定;C和D是包埋法,C一般是将酶包埋在细微网格里,D是包埋在凝胶中。制备固定化酵母细胞用的是包埋法,即将酵母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中,所以与D相似。
【方法技巧】关于固定化酶和固定化细胞技术的三种固定方法适用范围不同
酶适合采用化学结合法和物理吸附法固定化,细胞多采用包埋法固定化,这是因为细胞个大,而酶分子很小,个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。
3.【解析】选B。高温所起的作用类似于解旋酶,使双链DNA变为单链。C过程为PCR技术的延伸阶段,当系统温度上升至72℃左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸在
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