老龄化与糖尿病并发症的早期诊断肽类生物标志物候选物研究.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 K．B05 老龄化与糖尿病并发症的早期诊断肽类生物标志物候选物研究 邓玉林，李淳，彭博，肖盛元 北京理上大学生命科学与技术学院，北京100081 关键词：糖基化反应，LC．MS，晚期糖基化终产物，生物标志物 随着社会经济的进步、人口老龄化和膳食结构的改变，糖尿病已经成为危害人类健康的重要疾 病，其发病年龄还有年轻化趋势，因而更具危害性。我国目前约有4000万人面临糖尿病的威胁。临 床研究证明，老年人、糖尿病人及肾病病人的血浆和组织中存在着高浓度的晚期糖基化终产物 (AGEs)。非酶糖基化反应发生在蛋向质的自由氨基和还原糖的醛基或酮基之间形成希夫碱，再经历 一系列重排形成Amadori产物，最后生成AGEs，并可进一步与其他蛋白质、核酸大分子物质以及脂 类形成交联物。AGEs参与糖尿病、尿毒症、老年性痴呆、衰老的发展过程，其形成和堆积导致糖 尿病的主要并发症肾脏病变。因此认为AGEs与人的衰老以及糖尿病等多种疾病的发生、发展有着 密切的关系。 本文以人血浆中的高丰度蛋白为研究对象，通过将人体内高丰度血浆蛋白(如HSA、IgG等) 与不同浓度的葡萄糖或甲醛共温孵，模拟体内蛋白质与葡萄糖或甲醛发生非酶糖化反应(Maillard 反应)，分别研究葡萄糖或甲醛对血浆蛋白的修饰作用。AGEs的生成使蛋白质发生交联反应导致结 构改变，蛋白酶解后经液相色谱．电喷雾质谱进行分析检测，利用比较蛋白质组学的方法和工具筛选 山典型的特异变化肽段，作为标志性肽段。HSA的12个肽段有可能作为糖基化或交联反应的生物 、 、 、 为 GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK TPEVTCVVVDVSHEDPEVK、ALPAPIEK、FNWYVDGVEVHNAK、 NQVSLTCLVK、 这些肽段可以作为进一步考察与糖 尿病相关的疾病诊断的肽类生物标志物的候选物。 通过比较糖尿病患者的皿浆样本与正常人血浆研究高丰度蛋白的肽段修饰变化规律，HSA的肽 段FKDLGEENFK、QTALVELVK、 TPEVTCVVVDVSHEDPEVK、ALPIAPlEK、 中fI勺肽段THTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPK、 第十七届垒国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 眦 吣畸 脚F 脚 眦k札．，。■ k， 血嘶■● ～自¨¨旧叫，．．L 圈一，葡萄塘对人m浆HSA的话饰情M AWAVAR：2LSQRFPK；3 FQNALLVR 本文还研究了人血浆中的其他四种高丰度蚩白载脂蛋白(APOAI)、转铁蛋白(TRFE)、抗胰蛋 白酶(AlAT)、巨球蛋白(A2MG)的修饰作用，发现了一些具有典型差异的标志性肚段。 我们首次提出以血浆高丰度蚩自中一组特征变化的肽段来作为早删诊断的生物标志物的新思 路，得出了一些可能作为肚类生物标志物的候选物．为进一步筛选血浆蚩白质组中的肚粪生物标志 物提供了重要依据，这将会弥补单一标忠物的特异性不高的缺陷，对耱尿病、老龄化等早期临床诊 断有重要意义。