海湾战争综合征大鼠模型海马神经细胞凋亡及Omi%2fHtrA2、Smac表达.pdfVIP

海湾战争综合征大鼠模型海马神经细胞凋亡 及Omi／HtrA2、Smac表达 研究生姓名： 宋美多 指导教师： 曲方教授 指导小组： 张景华主治医师 何凡主治医师 专业名称： 神经病学 摘要 背景与目的：海湾战争综合征(GulfWarSyndrome，GWS)，也被称为海湾战 War 争疾病(Gulfillness，GWI)，已成为美国政府、参与海湾战争的退伍军人 及其家庭日益关注的疾病。其病因及发病机制也极为复杂，与多种环境因素及化 学物质的接触及物理应激等有关，比如神经毒气、贫铀、石油燃烧烟雾、溴吡斯的 明(PB)、杀虫剂(DEET、氯菊酯等)、压力应激、心理因素等。目前，海湾 战争流行病学研究唯一的一致性发现是PB及驱虫剂是与GWS明显有关的两种情 况。研究已经证实，GWS患者大脑海马、扣带回等脑区体积缩小，大脑白质体积 减少，双侧脑室扩大。动物实验也提示海马神经细胞死亡。Om埘trA2和 Smae／DIABLO是两种线粒体蛋白，在细胞凋亡的过程中发挥着重要作用，当细 胞受到凋亡刺激因素作用时，二者从线粒体内膜间隙释放入胞质，经过一定的修 饰成熟后发挥其促凋亡的作用。米诺环素为第二代人工半合成四环类抗生素，容 易通过血脑屏障，是一种easpase．3抑制剂，具有神经保护作用。本实验目的，联 合应用PB、DEET及束缚应激建立海湾战争大鼠模型，观察海马CAl区神经细 胞凋亡、Omi／HtrA2及Smac的表达，并探讨米诺环素的神经保护机制。 方法：实验设立正常对照组、束缚应激组、GWS模型组及米诺环素组。正常 对照组大鼠自由取水进食，给与等量的酒精溶液皮下注射。束缚应激组给予大鼠 每天置于狭小(仅能容纳大鼠身体，大鼠无法进行转身及其他活动)暗环境(完 乙醇皮下注射+束缚20分钟。米诺环素组：在GWS模型的基础上给予腹腔注射 米诺环素45mg／kg／d。各组实验周期均为28天。实验结束后，行多聚甲醛灌流固 定、取脑、石蜡包埋、切片，采用TUNEL法检测海马CAl区神经细胞的凋亡情 况，采用免疫组化检测大鼠海马CALl区神经细胞HtrA2及Smac的表达。 结果：束缚应激组与对照组相比较，海马CAl区神经细胞凋亡数量、HtrA2 及Smac积分光密度值无统计学意义(尸0．05)。模型组与对照组相比，海马CAl 区凋亡细胞数增多，HtrA2及Smac积分光密度值明显增高，统计学差异非常显 HtrA2及Smac积分光密度降低(p如．01)，统计学差异显著。 结论： 1．海湾战争综合征大鼠模型海马CAl区神经细胞凋亡增多，HtrA2及smac 表达增加。 2．HtrA2和smac在海湾战争综合征大鼠海马神经元凋亡的调控中均发挥了重 要作用。 3．米诺环素通过抑制Caspasc．3的表达，减少神经细胞凋亡，对海湾战争综合 征海马CAl区神经细胞损伤具有保护作用。 关键词：海湾战争综合征；细胞凋亡；Omi／HtrA2；Smac；海马；米诺环素 2 Neuronal and ofOmi／HtrA2 Apoptosisexpression andSmacmacin 1 naaeraareai‘na ocampal hippocampa’CAl RatModelofGulfWar Syndrome Master Meiduo