2种康唑类药物的HS-β-环糊精HPCE手性拆分研究.pdfVIP

2种康唑类药物的HS—p一环糊精 HPCE手性拆分研究 吴筱丹 朱亚尔 (浙江大学分析测试中心杭州310029) 摘要：目的：建立酮康唑和益康唑对映体的毛细管电泳手性拆分法。方法：10mmol·I．-1H孓B环 一20kV，毛细管温度为20。C，检测波长为214nm，对酮康唑和益康唑对映体进行手性分离研究，并考察了 多种因素对分离的影响。结果：在该毛细管电泳色谱条件下，酮康唑和益康唑对映体均能得到基线分离。 结论：本方法简单、快捷、经济，可适用于酮康唑和益康唑对映体手性分离。 关键宇：酮康唑；益康唑；手性拆分；HS一8一环糊精；毛细管电泳 目前市场上销售的手性合成药物，大多数都是以外消旋体形式面市。但是药物外消旋 体的两个对映体在药理活性上往往存在较大差异，从而表现出不同的疗效和毒理学性能。 因此，药物对映体的拆分在药物、临床以及生命科学中具有十分重要的意义。近几年，飞速 发展的高效毛细管电泳技术，在手性分离方面显示出其他方法不可比拟的优越性。在毛细 管电泳手性拆分的模式中，添加手性选择剂的毛细管区带电泳(CZE)是最常用的手性分离 方法。其中最常用的手性选择剂是环糊精及其衍生物，而带负电的环糊精，特别是硫酸化 环糊精应用于各类对映体的手性拆分均获得良好的分离效果，显示出强劲的手性分离和识 别能力‘Ⅲ]。 有关手性药物的拆分研究很多，但对康唑类药物的手性分离却相对较少[3棚，本文以高 度硫酸化一G一环糊精作为手性选择剂，对两种康唑类抗真菌药物酮康唑和益康唑(结构式见 图1)进行手性对映体拆分，建立了简单、快捷的康唑类药物的手性拆分方法。 图1手性药物的化学结构式 · 93· 1仪器与试剂 P／ACEMDQ高效毛细管电泳仪(Beckman—coulter 英毛细管柱(57cm×50／．tmI．D×375／xm ChemicGmbHCH一9471 Buchs，瑞士)；磷酸、三乙醇胺均为分析纯试剂；水为双蒸水；酮康 唑和益康唑消旋体由浙江省药品检验所提供。 2 电泳条件 未涂渍石英毛细管柱(57cm×50／xm O．D，有效长度50cm)，背景电解质 I．D×375／xm HS—G一环糊精，运行电压为一20kV，毛细管温度为20。C，检测波长214nm，采用压力进样， 行缓冲液平衡10min，两次进样之间，用缓冲液平衡3min。对映体的分离图谱见图2所示。 】|L ‘一 ketoconazol 6 8 10 6 7 8 9 图2酮康唑和益康唑的对映体分离 3结果与讨论 3．1环糊精种类的选择 环糊精是由7个葡萄糖单元通过1，4糖苷键连结而成，呈环状结构，并且具有疏水的 内空腔和亲水的外表面。而硫酸化环糊精是将羟基用硫酸基取代，使环糊精空腔的开口端 引入了新的电性作用和离子交换作用，从而增强了手性识别能力，同时由于硫酸化环糊精 在所有pH条件下均带负电，而本实验中酮康唑和益康唑在低pH值下带正电，使用硫酸化 环糊精反向电压的分离模式，带正电的药物离子受到强负电性硫酸化环糊精的包合作用， 随之向正极迁移，有利于硫酸化环糊精与对映体充分作用。因此，本实验选择HS一8一环糊 精作为手性添加剂，并对HS—G一环糊精添加浓度进行考察，结果表明浓度以10mmol·L一1 为最佳，当浓度过大时，基线不易稳定，谱峰展宽。 3．2缓冲液pH值的选择 缓冲液的pH值可以影响电渗流的大小、待分析物质的电离情况和环糊精的电荷分布 情况，因此改变缓冲液pH可以改善手性药物的分离情况。在本实验中考察了缓冲液pH 值为2．5、3．0、3．5条件下，酮康唑和益康唑的对映体分离情况(图3、图4)。结果表明，在 · 94· 三种pH条件下，酮康唑和益康唑的对映体均能达到分离，随着pH值的增加，分离度增大。 这可能是因为在酸性条件下，酮康唑和益康唑完全质子化，EOF被抑制，运用逆向电泳操