N-%272-%2c3-亚乙烯基鸟苷的合成及光谱性质研究.pdfVIP

—————————弋兰!里三查堡塑窒竺堂查垒竺墨堡l N2，3一亚乙烯基鸟苷的合成及光谱性质研究 吴春辉‘ 周杰 (山东农业大学化学与材料科学学院，山东泰安，271018) 摘 要：本文描述了N2，3一亚乙烯基鸟嘌呤核苷(e—G)合成路线，研究了￡一G在不同pH下的 紫外、荧光光谱性质，分析了e—G质子化、非质子化以及去质子化型体闾的分布情况。e—G的 荧光性质决定于它的非质子化的型体．不同介质下荧光性质研究表明￡一G与水存在着氢键作 用，进一步增强了它的荧光强度。利用其对牛血清白蛋白(BSA)的荧光猝灭作用，探讨了二者之 间的作用机理，测得其结合常数K。一3．891×i03L／mol，结合位点数行=1，为￡一G作为荧光试 剂提供了理论依据。 关键词：N2，3一亚乙烯基鸟嘌呤核苷；合成；荧光；结合常数 核苷是核酸的重要组成部分，其嘌呤环上引入不同的取代基团所得衍生物表现出抗病毒、抗癌和降血压等 重要的生物活性和强的荧光性质[1“]。亚乙烯基嘌呤核苷衍生物具有两个咪唑环形成的的三环独特结构，不 仅具有一定的生物活性，而且在荧光特性方面还具有量子产额高、荧光寿命长、发射荧光强度大，荧光波长处在 可见区使荧光检测不受蛋白质存在的干扰等特点卧]。众所周知，N6一亚乙烯基腺嘌呤核苷在pH一7的缓冲介 质中能产生较强的荧光，作为荧光探针试剂，广泛用于蛋白质、酶、核酸的结构和功能研究以及核苷的结构位点 和构象分析等生物化学性质的研究一~8]。但是，对鸟嘌呤三环结构核苷的荧光性质及生化性质的研究报道很 少嗍。本工作以鸟苷为起始原料，经6步合成了N2，3一亚乙烯基鸟嘌呤核苷，通过核磁共振，元素分析和红外 光谱对中问产物和标题化合物进行了结构表征，进而研究了它的紫外、荧光光谱性质，考察了它与牛血清白蛋 白(BSA)的作用机理，测定了二者的结合位点数和结合常数，旨在进一步了解e—G的生物活性及光谱性质，为 其在蛋白质、核酸、酶的结构功能和药理研究方面作为荧光探针试剂奠定理论基础。 1材料与方法 1．1材料与仪器 核磁共振波谱仪(400 光度计(美国Themurele山‘Oi-)；RF (DIAD)、溴代乙醛缩二乙醇、10％Pd—C、7．0 mmol／L，在O～4℃保存备用。 浓度为0．25mol／L；N2，3-亚乙烯基鸟嘌呤核苷的二甲亚砜溶液的浓度为2．29 *基金资助：山东省中青年奖励基金资助项目(No：02BS019) 溴乙醛的制备：取一干净的50mL烧瓶，依次加入15mL的1mol／LHCl溶液，5mL溴代乙醛缩二乙醇 和5mL乙醇，37℃下搅拌反应72 h，冷却至室温得一均匀透明溶液。将此含有约1．3mol／L溴乙醛溶液，放 在一20℃的冰箱中保存备用。 1．2 合成方法 1．2．12’，3’，5，-三一O一乙酰基鸟苷(2)的制备 5 称取11．093g(39．18ret001)已干燥的鸟苷，在氮气保护下依次加入74mL无水吡啶和62mL重蒸乙酸 酐，室温下搅拌反应75h，TLC检测表明反应完全。减压除去多余的乙酸酐和吡啶，然后用90 mL乙醇洗涤6 0 次，经真空干燥后得14．752 3429cm-。、3338cm～、1596cm 3 153 750 RNH2 ；CH3COORcm～、1 1H，H一8)，6．55(S，2H，NH2)，5．99(d，1H，H一1’)，5．80(t，1H，H一27)，5．51(t，1H，H一37)，4．24 ～4．41(m，1H，H一4’，2H，H一5 7)，2．12(S，3H，CH3CO)，2．05(S，6H，2CH3CO)．计算得：C46．92， H4．681，N 46．93，H4．705，N17．85． 17．12；结论：C 1．