丹参煎煮化学成分溶出规律研究.pdfVIP

丹参煎煮化学成分溶出规律研究 李耿7，于长安1，李振坤2，唐仕欢2，廖文强1，杨洪军2· (1．中日友好医院全国中西医结合心血管病中心，北京100029； 00070) 2．中国中医科学院中药研究所，北京1 中药的疗效是由一系列化合物群(有效成分)的协调作用而体现的，在药材、饮片质量 稳定的前提下，随着煎煮时间、溶剂用量、煎煮次数、药材粉碎粒度、煎煮溶剂极性、煎煮 的温度和压力等因素变化，煎煮溶出的活性成分的含量及比例相应发生变化，从而影响临床 用药效果。本研究采用析因试验设计，对丹参进行了多因素、多水平的交叉试验，较为全面 的考察了其多种活性成分在煎煮过程中溶出和变化的规律，为合理用药提供科学依据。本文 主要探讨了煎煮时间、水用量、煎煮次数3个因素对丹参主要有效成分影响(其它因素的影 响另文讨论)。 l仪器和材料 1．1 统、自动进样恒温样本管理器、二极管阵列检测器、Empower2色谱工作站。 1．2 试剂 甲醇(色谱纯，美国Fisher)，冰醋酸(分析纯，北京化工厂)；煎煮用水： 蒸馏水；色谱用水：娃哈哈纯净水(市售瓶装)。 1．3 --200417)、隐丹参酮(批号852—9903)对照品均购自中国药品生物制品检定所。 1．4饮片丹参饮片，购自北京同仁堂药店，产地为山东。 2方法与结果 2．1试验设计 2．1．1加水倍数目前临床常规用药时，一般每剂药的最终煎出液体积约为360--一400mL(2 袋／剂，约180～200mL／袋)；药典规定丹参用量为9～159，因此本研究设计重点考察加水倍 加水倍数的方式。 2．1．2煎煮时间为全面研究各成分煎煮过程中的变化规律，本试验分别考察了煎煮15， 30，45，60，90min的情况。 2．1．3煎煮次数考察丹参2次煎煮仍有成分溶出，为全面考察各成分的溶出总量及变化规 律，因此全部试验都进行了第3次的煎煮，第3次煎煮液的主要指标成分丹酚酸B含量增加 很少，认为基本提取完全。 ． 、2．1．4析因试验设计析因试验设计又称为完全交叉分组试验设计，是一种多因素、多水平 【基金项目】：国家科技基础条件平台项目(2004DEA71170)；中日友好医院重点学科资助项目 (ZDXK—LX01-01) 2t2 单效应的交叉分组试验，它可提供较多的信息，缩小随机误差，全面比较各因素水平间的效 应。为全面考察煎煮过程中丹参各有效成分的含量变化规律，本研究结合实际临床用药情况， 采用析因试验设计，进行了3个主要影响因素、多水平的全部交叉试验。各因素和水平如表 l。 表1因素水平表 Tab1 of Designexperiments ．()括号内表示实际称样量。 2．2试验方法称取与上述各加水倍数相应重量的丹参饮片，加水250mL，按上述各因素不 同水平分别进行回流煎煮，煎出液过滤冷却，定容至250mL，精密量取上述各次试验的煎出 液lmL，用甲醇稀释定容至lOmL，用0．2岫的滤膜过滤，取续滤液进样1儿。 2．3饮片中药典规定成分的含量测定根据《中国药典》2005版一部丹参项下u1测定该批丹 参饮片中丹酚酸B和丹参酮II一的含量，结果二者含量分别为8．231％和0．242％。 2．4饮片中其它成分的含量测定 UPLC 2．4．1色谱条件色谱柱为ACQUITYB髓C，8色谱柱(2．1mmX50mm，1．7岫)；流动相： 8％，2～7min A相为1％甲酸溶液，B相为甲醇；色谱梯度(以B相的比例表示)为：O～2min 33％，7～9min 温度：4℃；进样量：1虬，各成分均完全分离(见图1)。 213