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电流型微囊藻毒素-LR 电化学免疫传感器的研究 ∗ 童萍，邵艳红，唐淑榕，张兰 ，陈国南 食品安全分析与检测教育部重点实验室，运动科学研究中心， 福建省食品安全分析与检测技术重点实验室，福州大学，福州350002 ∗E-mail: zlan@fzu.edu.cn 蓝藻水华在世界范围频发，其污染程度迅猛增长，由其引起的水质安全和食 品安全问题已成为全球性卫生问题。淡水中蓝绿藻分泌产生的蓝藻毒素是目前已 发现的污染范围最广的一类藻毒素，其中以微囊藻毒素- LR （MC – LR ）最常见。 世界卫生组织（WHO ）建议饮用水中藻毒素标准为 1.0 µg/L[1] 。因而藻毒素的检 测具有极其重要的意义，目前水中微囊藻毒素检测方法有高效液相色谱法（HPLC ） [2] 和液质联用（LC –MS ） ，不但可以定性和定量，且精确度高，但该法费时繁琐 [3] 且仪器昂贵难以普及；酶联免疫吸附检测（EL ISA ） 灵敏、快速，但其线性范围 窄、成本高，应用范围受到限制。免疫传感器是将免疫测定法与传感技术相结合 而构建的一类新型亲和性生物传感器，广泛应用于痕量免疫原性物质的检测[4] 。将 其应用于MC - LR 的测定，可以实现快速、灵敏、实时检测。 本文将MC-LR 固定在修饰了石墨烯（GO ）的玻碳电极表面，以竞争反应模式， 将标记有电活性的二茂铁标记的抗体特异性结合到上电极面表，通过检测标记在 抗体上的二茂铁的信号间接检测MC-LR 。采用DPV法对抗原MC-LR进行定量检测， 以二茂铁电流信号与MC-LR 的浓度之间的关系作为定量依据，检测限达0.005 ng/mL （S /N = 3），方法具有很好的重现性。 图1是不同修饰电极在5 mmol/L [Fe(CN) ]4−/3− （含 0.1 mol/L KCl ）溶液中的 6 交流阻抗谱图，从图中可以看出，随着抗原、抗体在电极表面的固定，电极表面 的阻抗逐渐增大，由此验证了其在电极表面的修饰。 图1 不同修饰电极的EIS 图 通过对石墨烯的量、抗原固定时间、抗原抗体孵育时间等实验条件的优化， 制备了竞争型MC-LR 电化学免疫传感器。以标记在抗体上的二茂铁的DPV信号与 MC-LR浓度之间的关系作为定量依据，传感器DPV信号与MC-LR浓度（ng/mL ） 在0.01-25 ng/mL 范围内呈良好的线性关系，线性方程为I=2.77434+1.40374C （R=0.9987 ），检测限为0.005 ng/mL （S /N = 3）。 本文由国家自然科学基金项目），教育部高等学校科技创新工程重 大项目培育资金项目（708056 ），福建省科技厅自然科学基金（2009J1028 ）资助。 参考文献： [1] World Health Organization (WHO), Guidelines for drinking water quality, second ed., World Health Organization, Geneva, 1998. [2] Mathysa W, Surholta B, J Hyg Environ Health 2004, 207:601 [3] Metcalf JS, Hyenstrand P, Beattie KA, Codd GA, J Appl Microbiol, 2000, 89:532. [4] Lv P, Min L, Yuan R, Chai Y, Chen S, Microchim Acta 2010, 171:297. Study on the construction of amperometric immunosensor for Microcyst