葡萄糖氧化酶基因在草地早熟禾转基因植株中的表达.pdfVIP

维普资讯 41O 江苏农业学报(JiangsuJ．ofAgr．Sci．)，2007，23(5)：410～414 葡萄糖氧化酶基因在草地早熟禾转基因植株中的表达 刘慧玲 ，一， 佘建明 ， 倪万潮 ， 袁 生 (1．南京师范大学生命科学学院，江苏 南京 210097；2．江苏省农业科学院农业生物技术研究所，江苏 南京210014) 摘要： 用农杆菌介导法将含有葡萄糖氧化酶基因(GO)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)的重组质粒导入草 地早熟禾品种超级伊克利，经卡那霉素筛选获得具有卡那霉素抗性的再生植株。PCR检测证明，GO基 因已整合到 草地早熟禾基因组中。RT—PCR检测、淀粉．KI显色反应和 H0定量检测结果均表明，GO基因在转录和翻译水平 上已得到表达。抗病性鉴定结果显示，转GO基因植株对锈病具有较高的抗性。 关键词： 葡萄糖氧化酶 ；草地早熟禾 ；转基因植株 中图分类号： $688．4 文献标识码： A 文章编号：2007)05-0410—05 Expression ofGlucose Oxidase Gene in Transgenic PlantsofKentucky Bluegrass(PoapratensisL．) LIUHui—ling ， SHEJian—ming， NIWan—chao ， YUAN Sheng (1．CollegeofLifeScience，NanjingNormalUniversity，Nanjing210097，China；2．1nstit~eofAgro-biotechnology，JiangsuAcademy AgriculturalSci- e／~／ces，Nanjing210014，China) Abstract： ThroughAgrobacterium—mediatedtransformation，therecombinantplasmidcarryingglucoseoxidasegene (GO)andneomycinph0sph0transferasegene(ⅣP Ⅱ)wasintroducedintoKentuckybluegrass(PoapratensisL．)．Re— generatedplantswithkanamycinresistancewereobtained．PCR analysisconfirmedthatGO genehadbeen intergatedinto thegenomeofthetransgenicplants．ExpressionoftheGOgenewasverifiedbyRT—PCR andcolorreactionwithKI—starch andmeasurementofH202content．TheGO transgenicplantsshowedstrongresistancetorustafterinoculatingleaveswith Puccinia coronatavat．coronata cummins． Keywords： glucoseoxidase；Kentuckybluergass(PoapratensisL．)；transgenicplant 草地早熟禾 (PoapratensisL．)属禾本科草本植 培育具有广谱抗病性能的草地早熟禾新品种具有重 物，原产欧洲和亚洲北部。它具有抗寒性强、绿期 要的意义 。 长、颜色光亮、草质柔软、耐践踏和耐修剪等优 良性 葡萄糖氧化酶 (GO)是Muller于 1928年在黑曲 状，为北美地区重要的草种之一。但草地早熟禾易 霉提取物 中发现的 ，可以催化 3-D一葡萄糖氧化生 受多种真菌感染，其病害的发生和蔓延，轻者可使草 成葡萄糖酸和 H0 。此酶已从黄色蠕形霉 (Talaro— 坪褪绿、黄化，形成枯死斑块