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全国生物化工技术发展研讨会论文与成果汇编 2011济南
复合菌强化修复重油污染土壤的研究
黄太鹏 张永奎’
(四川大学化学工程学院，四川成都，610065)
摘要：使用从新疆塔河油田污染土壤分离得到的三株细菌(2撑Acinetobacter
sp．，
4#Kocuria
sp．和7撑Kineococcussp．)构建复合菌群，以强化修复塔河油田重油污染土壤。
通过正交实验确定三株菌的最佳接种量为4撑茵接种量为0．5％，2撑菌的接种量为0．5％，
7撑菌的接种量为0．5％，得到最佳降解率在7天内达到49．22％。气质联用数据表明复合
茵群能降解更多的石油组分。
关键词：生物修复；重油；复合菌；GC／MS
石油污染物的微生物降解由于其环境友好、价格低廉和应用广泛等优点，在国内外
已有很多研究【11。相同条件下，微生物对不同类型石油烃的降解能力是不同的。各类石
油烃被微生物降解的相对能力如下：饱和烃芳香烃胶质和沥青‘21。因此目前对稀油的
降解取得了一定的成果，降解率达到80％以上，而对胶质和沥青质含量高的重油污染
土壤的修复效果并不理想，主要表现为周期长，降解率低。为此，本文利用实验室筛选
Pa／s，
得到的三株高效降解石油菌株，构建复合菌群强化修复重油(50℃时粘度为30
90℃时密度为0．9962
g／cm3)污染土壤。
1材料与方法
1．1实验材料
1．1．1油样
油样来自新疆塔河塔河油田，50℃时粘度为30Pa／s，90℃时密度为0．9962
g／cm3。
1．1．2菌株
实验用3株细菌编号为2}f、4≠}和7{}，分离自塔河油田原油污染土壤，经16SrRNA
鉴定为Acinetobacter
sp．(2j5f)，Kocuriasp．(4≠})和Kineococcussp．(7拌)．
1．1．3培养基
5．0，牛肉膏3．0，蛋白胨10．0。
牛肉膏蛋白胨培养基(∥L)：NaCI
0．5，NaN03
无机盐培养基(g／L)：NaCI1．0，(NH4)2S04 0．5，KH2P041．0，NaH2P04
1．0，CaCl2 7．07．2。
O．02，MgS04O．5，FeCl3痕量，pH
1．2实验方法
1．2．1石油污染土壤
土壤去杂、烘干，粉碎后过筛40目；取过筛后干土，加入一定量溶于三氯甲烷的
石油，充分搅拌，得到一定污染强度(即石油质量百分比)的污染土壤；将混合物于通
’Email：zhangyongkui@sou．edu．ca
全国生物化工技术发展研讨会论文与成果汇编 201
1济南
风橱中，待三氯甲烷挥发完后，取出磨碎、混匀。
1．2．2菌悬液制备
挑取活化好的单菌，接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，摇床(30℃、180r／rain)培
养3d，后以10％的接种量接种于牛肉膏蛋白胨培养基中进行扩培，摇床(30℃、180
r／min、10
r／rain)培养18h，离心(4500 rain)去除培养基，并用无菌水冲洗，重复上
述操作两次，配置成一定浓度的菌悬液。
1．2．3以不同石油组分为单一碳源生长情况考察
挑取活化好的单菌，分别接种于以正己烷、液体石蜡、煤油、机油作为单一碳源的
20mL无机盐培养液中，摇床培养(30℃、180r／min
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