杭州地区四种野鸭的分子遗传多样性研究.pdfVIP

ShiJie 第二届中国水禽发展大会 研究报道 ShuiQin 杭州地区四种野鸭 的分子遗传多样性研究 章学东1，张伟武1，严冰2，韩水永3，楼立峰1，范京辉1，周佳捷2，李慧芳4 (1．杭州市农业科学研究院，浙江杭州310024；2．杭州市农业局，浙江杭州310002； 3．萧山区农业局，浙江萧山311203；4．中国农业科学院家禽研究所，江苏扬州225003) 摘要：为揭示杭州地区野鸭遗传多样性的现状，以利于进一步开展保护、开发和利用。本研究运用8个 微卫星标记对地区内媒头鸭、斑嘴鸭、钱江野鸭和西湖野鸭等4种野鸭进行了分子遗传学检测，结果表明：8个 度多态外，其余座位均为高度多态；4种野鸭的平均期望杂合度以西湖野鸭最高(0．5971)，斑嘴鸭最低 有效的遗传标记用于野鸭遗传结构分析，4种野鸭群体的遗传多样性较为丰富。 关键词：微卫星标记；野鸭；遗传多样性 杭州地区位于浙江省西北部，东临杭州湾，境内水网密布，气候温和湿润，适宜于水禽栖居。我市群众在 长期的生产实践中，将野鸭经过驯养、繁育，形成了数个地方种和培育种，成为本地区水禽养殖的一大亮色。 20世纪90年代以来，微卫星作为评估动物遗传多样性的理想分子标记，在畜禽遗传资源研究中得到广泛应 用，起到了了解品种遗传结构、分析进化历史以及指导育种和生产的重要作用。目前国内外利用微卫星标记 记对杭州地区媒头鸭、斑嘴鸭、钱江野鸭和西湖野鸭等4种野鸭进行了分子遗传学检测。通过揭示其遗传多样 性的现状，为本地区野鸭品种的进一步保护、开发和利用提供参考依据。 1材料与方法 1．1试验材料 1．1．1血样 。 沙经济技术开发区，每种野鸭各取10公20母共30个血样。 1．1．2引物 有限公司合成(见表1)。 研究梆U茸 第二届中国水禽发展大会 水禽世界 表1 8对微卫星引物序列特征及退火温度 1．I．3主要仪器设备 PCR扩增仪：Eppendorf LCS NO．00086．美国。 1．1．4主要试剂 试验所用Taq IMarkers作为分子 DNA聚合酶和dNTPs均购自上海生工生物公司，采用pBR322DNA／Msp 量的标准对照。 1．2试验方法 1．2．1采血 ． 每只鸭跖静脉采血1．5～2ml，加入盛有7～8ml70％无水乙醇的离心管中，混匀后置于一200C冷冻保存。 1．2．2血液基因组DNA的提取 参照文献【111并稍加改进，对基因组DNA进行OD值测定，调整DNA终浓度至50Ilg，斗l。 1．2．3 PCR扩增 mmol／L mmol／L DNA dNTPs、5 PCR．反应体系25山，包括10xbuffer2．5山、2．5M[矿、0．2 pmol／L引物、1UTaq DNA模板。扩增反应程序为：95。C预变性4min；94。C3睢508，55—58。CN火50s，72。Ct垂伸lmin， 聚合酶、50Ilg 30．35个循环；最终72℃延伸5min。 1．2．4产物检测 扩增产物在IxTBE缓冲液、8％非变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳后，用银染法染色，成像系统拍照，根据 Markers判断扩增片段大小。 1．2．5数据统计与处理 1000个重复抽样数得到。 2结果 2．1微卫星座位的遗传特性 8个微卫星座位在杭州地区4种野鸭内的平均遗传变异参数见表2。由表2可见，试验共检测到35 ShiJie 第二届中国水禽发展