沉默piRNA-651抑制骨肉瘤细胞系U20S增殖和转移的影响.pdfVIP

西部 医学 2014年 8月 第 26卷第8期 MedJWestChina，August2014，Vo1．26，No．8 沉默 piRNA一651抑制骨肉瘤细胞系U20S增殖 和转移的影响 杜 皤 ，刘志斌 ，贺永进 (延安大学 医学 院附属 医院骨二科 ，陕西 延安 716000) 【摘 要】 目的 研 究非 编码 小 RNA piRNA一651对骨肉瘤 U20S细胞 增殖 、侵 袭与转移 的影响 。方法 通过 RNA 干扰技术沉默 U20S细胞 中的 piRNA一651，并应用实时定量 PCR(qRT-PCR)检测骨 肉瘤 U20S细胞 中piRNA一651的表 达情况 ；流式细胞术检测细胞周期的变化 ，MTT实验检测沉默 piRNA_651表达对细胞增殖的影响，Transwell侵袭实验 检测细胞侵袭能力的变化 ，细胞划痕实验检测细胞转移能力的变化 。结果 piRNA一651一siRNA可有效沉默 piRNA～651 在骨 肉瘤细胞 U20S的表达 ，敲低 U20S细胞 中piRNA一651的表达可以明显阻滞骨肉瘤细胞 的细胞周期，抑制骨 肉瘤细 胞的增殖、侵袭与转移能力 。结论 piRNA一651在骨 肉瘤 的发生发展及侵袭转移 中发挥着重要作用。 【关键词】 piRNA一651；U20S细胞 ；骨 肉瘤 ；增殖 ；侵 袭 ；转移 【中图分类号】 R738．6 【文献标志码】 A doi：10．3969／J．issn．1672-3511．2014．08．004 SilencingpiRNA一651inhibitedosteosarcomaU20Scells growth，invasionandmigration DU Fan，LIUZhi—bin，HEYong-jin (DepartmentofOrthopedic。TheAffiliatedHospitalofYah’anUniversity，Yan’an716000，China) [Abstract] Objective ToinvestigatetheeffectsofpiRNA一651ontheproliferation，invasionandmigrationofhu— manosteosarcomacancerU20Scells．M ethods ThepiRNA一651mRNA expressionofU20ScellU20Stransfectingwas detectedwith siRNA orcontrolsiRNA byquantitativerealtimePCR (qRT-PCR)．AftersiRNA andcontrolsiRNA transfectedintoU20Scellsfor48hours．TheproliferationofU20ScellswereanalyzedbyMTT．ThecellcycleofU20S cellswasanalyzedbyflow cytometry，U20ScellsinvasionabilitywasanalyzedbyTransweltcellinvasionassay．Themi— grationcapacityofU20Scellswasdetectedbywoundhealingassay．Results ThemRNA expressionlevelofpiRNA一651 inU20ScellswaseffectivelysilencedbypiRNA—r651—-siRNA andU20Scellsproliferationandcellcyclewasinhibitedafter transfectedpiRNA～651一siRNA．TheinvasionandmigrationabilitiesofU20ScellsdecreasedaftertransfectedpiRNA一651一 siRNA．Conclusion piR