芽孢杆菌紫外诱变发酵条件多环芳烃铜绿假单胞菌PAOI降解途径论文.docVIP

芽孢杆菌论文：芽胞杆菌诱变育种铜绿假单胞菌PAO1菲萘降解相关研究 【中文摘要】由于细菌耐药性的普遍存在,且人类已经严重依赖抗生素,因此开发新型抗生素或抗生索替代产品的需求比以任何时候更迫切。本实验室人员从辣椒植株表皮下分离得到一株芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),前期研究已初步证实从该菌株培养液中提取出的活性成分中可能含有一种新型抗菌物质,但由于该抗菌物质产量太低且在发酵过程中产生多糖较多,不利于工业生产及后续的分离提取工作的进行。本实验的研究内容之一是采用紫外诱变的方法选育抗菌物质高产、多糖低产菌株。首先,通过观察比较诱变菌株对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,从1.0×105个诱变菌株中筛选得到30株产抗抗菌物质增加的菌株,经复筛得到1株抑菌性最强的优势菌株。将优势菌株进行第二轮紫外诱变,通过观察菌落形态,从1.2×105个诱变菌株中筛选出12株菌落形态扁平的菌株,即希望为多糖分泌减少的菌株,通过测定诱变菌株培养液中多糖含量及其萃取成分对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,最终筛选出2株抗菌物质产量增加且多糖分泌减少的目标菌株,经传代培养该菌株性状稳定。随后对目标菌株进行了发酵条件优化,包括发酵时间、温度、pH及溶氧量。实验结果表明最佳发酵条件为：发酵时间为6... 【英文摘要】It is more pressing to develop new antibiotics or the substitute of antibiotics with the high tendency of bacterial resistance to antibiotics.A strain which was isolated from the subcuticular of capsicumu was indentified to be in the genus of Bacillus. The ingredient extracted from the the culture was preliminarily proved to be a new antibacterial material. However, the strain produced low level of this antibacterial material and lots of polysaccharide in fermentation process. These are not conducive fo... 【关键词】芽孢杆菌 紫外诱变 发酵条件 多环芳烃 铜绿假单胞菌PAOI 降解途径 【英文关键词】Bacillus ultraviolet mutagenesis fermentation conditions Polycyclic aromatic hydrocarbons Pseudomonas aeruginosa PAO1 degradation pathway 【目录】芽胞杆菌诱变育种铜绿假单胞菌PAO1菲萘降解相关研究 摘要一 3-4 Abstract one 4-5 摘要二 5-6 Abstract two 6-12 第一部分 芽抱杆菌诱变育种 12-34 第一章 绪论 13-19 1.1 抗生素的发现及应用 13 1.2 抗生素耐药性 13-18 1.2.1 抗生素耐药性的产生及现状 13-15 1.2.2 抗生素的耐药机理 15-16 1.2.3 产生抗生素耐药性的人为原因 16-17 1.2.4 应对抗生素耐药性的措施 17-18 1.3 新抗生素和抗生素替代品的开发研究 18 1.4 本课题的研究内容和意义 18-19 第二章 实验材料与方法 19-24 2.1 菌株 19 2.2 培养基及试剂 19 2.3 仪器 19-20 2.4 试验方法 20-24 2.4.1 生长曲线的测定 20 2.4.2 菌落形成单位的测定 20 2.4.3 菌悬液制备及最佳诱变时间的确定 20 2.4.4 紫外诱变过程 20-21 2.4.5 抑菌实验复筛诱变菌株 21 2.4.6 滤纸片法抑菌实验复筛诱变菌株 21 2.4.7 第二轮紫外诱变 21-22 2.4.8 葡萄糖标准曲线的测定 22 2.4.9 多糖含量的测定 22 2.4.10 筛选最佳突变体 22-23 2.4.11 发酵条件的优化 23-24 第三章 实验结果与讨论 24-33 3.1 芽孢杆菌生长曲线 24 3.2 最佳诱变时间的确定 24-25 3.3 诱变菌株的初筛选 25-26 3.4 复筛诱变菌株 26 3.5 第二轮紫外诱变 26-27 3.6 复筛第二轮诱变菌株 27 3.7 多糖含量测定结果 27-29 3.8 最佳诱变菌株的确定 29-30 3.9