7-9土壤微生物的稀释分离75674.pptVIP

第2次： 从土壤中稀释分离微生物 一、熔化固体培养基，倒平板： 2个同学1组，其中1人取牛肉膏1瓶，1人取马丁孟加拉红1瓶，微波炉内熔化。待培养基冷却至55℃；马丁孟加拉红培养基，每瓶加入链霉素2 mL。 二、土壤悬液制备 每大组(4人)准备1瓶土壤悬液：称10克土壤放入带玻璃珠的90mL 瓶装无菌水中，振荡10min，使土样分散。 三、悬液稀释：每2个同学做一套土样的系列稀释液，方法见图。 四、悬液涂布 每2个同学按图示取0.1mL菌悬液于相应培养皿内，每稀释度3皿，3个稀释度，共9皿。 五、培养： 每个同学将培养皿用报纸包好（培养皿方向一致），写上班级和姓名，皿底朝上，放入铁丝筐， 28℃培养，下周看结果。每2个同学共用1组数据。 土壤悬液稀释示意图 第3次 （1）结果观察、划线纯化 （2）生理生化实验 培养基配制和材料准备 一、划线纯化、斜面接种 二、结果统计与分析：取细菌菌落数30～300的稀释度、真菌菌落数10～100的稀释度计数。计算。请写明培养基、选择的稀释度和计算过程，以科学计数法表示每克土壤中的活菌数（单位：cfu）。 三、完成3次实验的完整实验报告。 * 实验7-9 土壤微生物的稀释分离与计数 第1次内容：配制培养基、准备实验材料 全班分为4个组，每组8人，准备如下物品： 1、培养基： A、B组：牛肉膏蛋白胨培养基 （固体， p155-1 ），每组500mL，分装50支试管。 C组: 牛肉膏蛋白胨培养基（固体，p155-1），4000mL，分装20瓶。 D组马丁孟加拉红培养基（固体，p155-6），每组4000mL，分装20瓶。 配制方法：药品称量，置入锅中 → 加自来水，微加热，搅拌溶解 →定容 → 调pH→分装入500 mL三角瓶，每瓶200 mL，并加入琼脂3克→加瓶塞，包扎。 2、其它器材，每组准备： 1）无菌水：2瓶，自来水，90mL / 瓶，加玻璃珠8-10粒 （大蓝盖瓶）; 2瓶，自来水，50mL / 瓶（小蓝盖瓶）。 2）装 1.5mL塑料离心管 20只/包，共2包。 3）装 1mL 塑料吸头4盒。 4）培养皿： 每人用报纸包 1筒培养皿，11 皿 / 筒。 注意：培养基请标上专业和班级，写在纸上。 3、灭菌：物品放入大铁丝筐 → 送灭菌室灭菌备用。 每个培养皿加0.1ml 稀释液 －2，－3，－4 稀释液涂马丁－孟加拉红平板； －4，－5，－6 稀释液涂牛肉膏蛋白胨平板 *