第十章DNA的生物合成（复制）.docVIP

第十章DNA的生物合成（复制）教学基本要求 描述遗传学中心法则，扩大的中心法则及生物学意义。 记住DNA合成的概念，包括以DNA作为模板指导的DNA合成（复制），以RNA作为模板指导的DNA合成（反转录）及DNA的修复合成。分别描述其概念。 复述DNA复制特点，过程，参与的酶和因子（包括它们的功能）。简要叙述复制过程及真核DNA复制特点。 结合反转录酶的功能，简要叙述反转录过程及其生物学意义。记住端粒酶的概念与功能。 列举DNA损伤的几种类型，写出修复合成的几种方式名称。叙述切除修复过程。 教学内容精要（一）遗传信息传递概述 DNA是遗传的物质基础。DNA分子中由4种不同碱基组成的核苷酸的排列顺序（以下简称碱基顺序）即是储藏的遗传信息。所谓基因，即指DNA分子中碱基组成的功能片段。DNA分子很大（如人类基因组DNA约含3×109个碱基对），但全部由AG、C和T四种碱基以不同的排列方式组成。不同的基因由不同的碱基序列构成并携带不同的遗传信息。细胞分裂时，通过DNA的复制，遗传信息从亲代DNA分子传到子代DNA分子中。另一方面，DNA分子储藏的信息要通过指导特异蛋白质的合成来体现其生物学功能。以DNA分子为模板，用四种dNTP做原料，以碱基互补配对原则将DNA的遗传信息抄录到mRNA分子中。这种将DNA的遗传信息传递给mRNA的过程称为转录。以mRNA为模板，按其碱基排列顺序，以三个相邻碱基序列决定一个氨基酸的密码子形式，决定蛋白质（肽链）合成时氨基酸排列顺序的过程称为翻译。通过转录和翻译，基因遗传信息从DNA传递到蛋白质，由蛋白质细胞一定的表型。遗传信息传递的规律，称为遗传信息传递的中心法则。 自然界某些RNA病毒还可以RNA为模板，指导DNA的合成。这种遗传信息传递方向与转录过程相反，称为反（逆）转录，它使遗传信息传递的中心法则被补充。（二）DNA的合成1.DNA生物合成的概念 DNA分子在生物体内经酶促聚合反应进行合成，DNA合成反应主要有DNA指导的DNA合成、RNA指导的DNA合成以及修复合成三种方式。以DNA作为模板指导的DNA合成作用称为DNA复制，由此将DNA携带的信息传至子代DNA。它是细胞内DNA最主要的合成方式；DNA的合成也可以RNA为模板指导DNA合成作用，这称为反向转录作用，可见于病毒。环境因素可以造成DNA分子结构的损伤，损伤的DNA可进行修复合成，即校正错误的序列，以保持DNA结构的稳定性。 2DNA的复制合成 (1)复制的概念：DNA复制开始时，亲代DNA双链分子打开，分别作为模板，在DNA依赖的DNA聚合酶催化下，按A与T、G与C碱基配对原则，自5′3′ 连续的合成一条前导链；不连续的合成一些片断，从而合成一条随从链，，所以DNA复制是半不连续合成。在子代DNA双链分子中，一条来自亲代的旧链，另一条为新合成的链，故DNA复制是半保留复制。 (2)DNA复制过程：真核生物的DNA复制过程与原核生物基本相似，但理尚不十分清楚。以原核生物为例，将E coli DNA复制过程分为以下阶段： 1)螺旋的松弛与解链：在DNA复制起始部位ori,先由DNA拓扑异构酶（Topo）改变DNA分子的超螺旋结构，然后在解链酶的作用下，解开双股链，再由单链DNA结合蛋白保护和稳定DNA单链，形成复制点。复制点的形状像叉子—即复制叉。 2)引发主要由引发酶和引发前体参与合成RNA引物。在前导链合成中，先由引发酶催化合成一段RNA引物（1060nt）；继而在DNA聚合酶催化下，以53′方向连续的合成DNA链。随从链引物的合成是在引物酶，引发前体以及DnaA蛋白联合作用下合成的。继而在引物的3′-OH端进行冈崎片段的合成。 3）DNA链的延长：DNA链的延长是在DNA聚合酶（DNA pol)催化下，以四种脱氧三磷酸(dNTP)即dATPdGTP、dCTP、dTTP为原料进行的合成反应反应体系中有DNA、引物及Mg存在。聚合作用是引物3′-OH端开始，沿5′3′方向逐个加入脱氧核苷酸dNMP而脱下焦磷酸PPi，使DNA链得以延长。DNApol仅催化DNA链沿5′3′方向的聚合作用，因此，解开双链后在3′5′方向的模板上可以按5′3′方向合成前导链；而以5′3′方向链为模板，仍然按5′3′方向成不连续的短冈崎片段。 4)终止：在DNA合成的片段内，由DNA聚合酶I外切酶活性切除RNA引物，致使各片段之间形成空隙，然后由DNA聚合酶I的聚合酶活性催化填补空隙，最后由DNA连接酶将这些片段再连接起来，成为一条长链。DNA复制完毕后，DNA Topo将DNA分子引人超螺旋结构。真核生物的DNA复制与Ecoli基本相似，但仍有一些特点，如复制的速度约为50nt/s(Eoli.为500nt/s)，有多个起始点，冈崎片段的长度小于原核生物，