ATRA 和9-cis-RA 对缺氧缺糖损伤PC12 细胞凋亡影响.docVIP

ATRA和9-cis-RA对缺氧缺糖损伤PC12细胞凋亡的影响 江 伟1 ，温恩懿，龚敏1，瞿 平1，毕杨1，张赟1，魏小平1，刘友学1，陈洁1，李廷玉1 (400014重庆医科大学附属儿童医院400037 重庆第三军医大学新桥医院儿科) [摘要目的 探讨不同型(全反式视黄酸 all-trans retinoic acid, ATRA9顺式视黄酸 9-cis-retinoic acid, 9-Cis-RA)对缺氧缺糖损伤的PC12细胞凋亡的影响，且受体途径作用。方法 实验分为： 0μmol/L RA1μmol/L，5μmol/L，10μmol/L，20μmol/L ATRA；1μmol/L，5μmol/L，10μmol/L，20μmol/L 9-CisRA。倒置显微镜观察缺氧缺糖损伤前后细胞形态变化，流式细胞术研究不同浓度ATRA和9-Cis-RA刺激缺氧缺糖损伤PC12细胞凋亡水平。ELISAATRA和9-Cis-RA处理4后PC12细胞的LDH释放水了解其胞膜损伤水平。结果 ATRA组凋亡率在1 μmol/L浓度时与未刺激组无差异(P＞0.05)，从5 μmol/L起随着浓度的增高凋亡率显著增高(P0.05)，在1020 μmol/L浓度显著高于相同浓度的9-Cis-RA组(P0.05)和未刺激组(P0.05)；而9-Cis-RA20 μmol/L组凋亡率低于组，但无显著性(P0.05)。LDH）释放水平在ATRA刺激组从5 μmol/L起随浓度的增高显著性增高(P0.01)，在5、10、20 μmol/L浓度均显著高于未刺激组和9-Cis-RA组(P0.05)，而在各浓度9-Cis-RA组与未刺激组无显著性差异(P0.05)。ATRA特异激活RARs), 而9-Cis-RA激活RARs和RXRs)。结论 在缺氧缺糖损伤的PC12细胞ATRA可通过激活RARs受体途径发挥促凋亡，但这种效应可以被激活RXRs受体途径而抑制。 关键词全反式视黄酸；9顺式视黄酸；视黄酸核受体；视黄醇X受体；PC12细胞；缺氧缺糖；凋亡 中图法分类号 R345．5；R730．263 文献码A ATRA and 9-cis-RA effect apoptosis in PC12 cell for OGD injury JIANG Wei1, WEN Enyi2, GONG Min1, QU Pin1, BI Yang1, ZHANG Yun1, WEI Xiaoping1, LIU Youxue1, CHEN Jie1, LI Tingyu1 (1Children’s Hospital, Chongqing University of Medical Sciences, Chongqing，400014, 2Department of pediatrics，Xinqiao Hospital，Third Military Medical University, Chongqing 400037，China) bstract] Objective To investigate how different RA configurations （all-trans retinoic acid, ATRA； 9-cis-retinoic acid, 9-Cis-RA）affect apoptosis in PC12 cells for oxygen and glucose-deprivation (OGD) injury, and which does the receptor pathway play the biological effect? Methods This research divided to the following groups: 0μmol/L RA; 1μmol/L，5μmol/L，10μmol/L，20μmol/L ATRA; 1μmol/L,5μmol/L，10μmol/L，20μmol/L 9-CisRA. We observed cell morphology before and after OGD injury with inverted microscope, and studied apoptosis rate of PC12 cells in OGD injury with different concentrations of ATRA and 9-Cis-RA stimulated by flow cytometry. Finally, we investigated the LDH release in PC12 cells by ELISA after 4 hours RA treat