一种酒糟饲料化活性菌剂喷雾干燥工艺条件的研究.docVIP

一种酒糟饲料化活性菌剂的喷雾干燥工艺条件研究 摘 要 研究以乳酸菌和米曲霉组成降解酒糟的复合微生物系，探讨其活性菌剂的喷雾干燥最佳工艺条件。以干燥乳酸菌菌粉和米曲霉菌粉活菌数为评判标准，对喷雾干燥进风温度、出风温度、进料流量、保护剂的种类及配比设计单因素试验与正交试验。结果表明: 进风温度为 150 ℃、进料流量为 50 r/min、菌液与保护剂配比为 1∶1 及复合保护剂配比为 1∶1 (10%β － 环糊精∶10% 麦芽浸粉)，为生产活性菌剂的喷雾干燥最佳工艺条件。该工艺条件下制备的乳酸菌菌粉和米曲霉菌粉活菌数分别达到 5. 2 亿和 7. 5 亿个/g 菌粉。 关键词 乳酸菌 米曲霉 喷雾干燥 生物制剂 工艺条件 开展清洁生产，发展可持续农业是 21 世纪可 持续发展的目标。把容易造成环境污染的白酒糟、 啤酒糟和酒精糟等发酵副产物及农作物下脚料综合 利用生产高效价的菌体饲料，是推行清洁生产、发 展生态农业、合理利用和节约资源及有效治理和保 护环境的一条可持续发展之路。 乳酸菌是动物体内的主要益生菌，能调整动物 肠道菌群间的生理平衡，降低肠道内腐败菌的异常 增殖及致病菌的入侵和定植，从而减少或消除体内 毒素的产生，是一种天然的饲料添加剂和优良的发 酵菌种来源。 米曲霉的酶系比较丰富，包括纤维素酶、糖化 酶、淀粉酶和果胶酶等。在发酵酒糟生产饲料的过 程中，淀粉酶和糖化酶作用于原料的淀粉物质，使 其充分分解为葡萄糖，增加饲料中的葡萄糖含量， 易于动物吸收利用; 果胶酶和纤维素酶作用于原料 外壁，使其内部的蛋白质等物质充分裸露，提高饲 料中的蛋白质含量。同时米曲霉不会产生真菌毒 素，因此是一种优良的发酵菌种。 降解酒糟的复合微生物菌剂的开发，可简化酒 糟发酵饲料的生产工艺，降低生产成本，提高发酵 饲料质量，有利于酒糟发酵技术的推广应用，对酒 糟发酵饲料产业化具有重要意义与长远的应用前 景。根据前期研究基础和酒糟原料的特点，米曲霉 及乳酸菌协同发酵能有效降解酒糟中的粗纤维，提 高真蛋白含量。因此，选取米曲霉和乳酸菌为优良 发酵菌种，组成酒糟降解复合微生物菌系，并通过 喷雾干燥制备乳酸菌活性菌剂和米曲霉活性菌剂， 以期为复合微生物菌剂发酵酒糟的工业化应用提供 上游技术及产品，最终解决废弃酒糟再利用的难 题，达到环境保护与经济增长的双重目的。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 乳酸菌和米曲霉: 四川理工学院实验室保藏; 牛肉膏蛋白胨培养基; 保护剂: β － 环糊精，成都 市科龙化工试剂厂; 麦芽浸粉: 北京博奥生物技术 有限责任公司; 脱脂奶粉: 伊利集团。 1.2 仪器与设备 ZHJH － 2112B 水平流超静工作台，上海智城分 析仪器制造有限公司; NSKY －2102C 恒温培养振荡 器，上海苏坤实业有限公司; YC － 015 实验型喷雾 干燥机，上海雅程仪器设备有限公司; BS －2F 数控 全温振荡培养箱，常州精诚国华仪器有限公司;科技动态 70 饲料研究 FEED ＲESEAＲCH NO. 12，2013 DZX － 50KA 压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗器械 厂; SHB － Ⅲ循环水式多用真空泵，郑州长城科工 贸有限公司。 1.3 试验方法 1.3.1 乳酸菌扩大培养 在 250 mL 三角瓶中装入 50 mL 牛肉膏蛋白胨 培养基，68. 65 MPa，灭菌 20 min。冷却后，在无 菌操作下，将培养48 h 的斜面菌种接5 环于250 mL 三 角瓶中，于 30 ℃旋转式摇床 150 r/min，振荡培养 24 h。吸取 10 mL 一级扩培液接种于 250 mL 三角瓶 中，于 30 ℃旋转式摇床150 r/min，振荡培养24 h， 即为二级扩培液。 1.3.2 米曲霉扩大培养 在 250 mL 三角瓶中装入 50 mL 察氏培养基， 68. 65 MPa，灭菌 20 min。冷却后，在无菌操作下， 用5 mL 无菌水洗脱培养72 h 的霉菌斜面得菌悬液， 加入三角瓶中，于 30 ℃旋转式摇床 150 r/min，振 荡培养 24 h。吸取10 mL 一级扩培液接种于250 mL 三角瓶中，于 30 ℃旋转式摇床 150 r/min，振荡培 养 24 h，即为二级扩培液。 1.3.3 喷雾干燥制备菌剂 将二级扩培菌液与保护剂混合，经喷雾干燥制 得菌剂，收集菌粉，无菌包装好冷藏待用。试验的 出风 温 度 控 制 在 80 ～ 100 ℃。水 分 控 制 在 低 于 10%。 1.3.4 菌剂的感观指标分析 通过对感观指标的分析 (观察颜色和闻其气味 等) 初步判定干燥的效果。 1.3.5 菌剂的菌体活性分析 将干燥后所得的菌粉活化，经稀释和涂布后， 采用平板菌落计数法测定活菌个数。 2 结果与分析 2.