中药羌活HPLC-荧光指纹谱研究.pdfVIP

第 27卷，第 2期 光 谱 实 验 室 Vo1．27．No．2 2010年 3月 ChineseJournalofSpectroscopyLaboratory March ，2 0 10 中药羌活HPLC一荧光指纹谱研究① 王海波② 邸学 包永睿 孟宪生 曹爱民 (辽宁中医药大学药学院 辽宁省大连市双 口港生命一路 77号 116600) 摘 要 建立不同来源羌活的高效液相一荧光检测指纹谱，为提高羌活药材质量控制水平提供参考。 色谱柱 ：MetachemODS·Cl8；流动相：乙腈一0．025mol／L磷酸水溶液 (45：55)，荧光检测条件：E=310nm、 一480rim；采用聚类分析法进行分析比较。得到 zO个共有指纹色谱峰 ，确定了基准样本色谱峰的相对保 留时间和相对峰面积 ，各羌活样品与基准样本相似度值均在 0．8以上．构建羌活的高效液相一荧光指纹图 谱质控方法。本试验所确定HPLC一荧光光谱的指纹图谱质控方法灵敏度高，稳定性、重现性良好，可作为羌 活药材的质量评价依据 。 关键词 羌活；高效液相色谱；荧光光谱，指纹图谱；聚类分析 中图分类号：O657．72 文献标识码：A 文章编号：1004—8138(2010)02—0568—05 1 引言 羌活 为 伞 型 科 植 物 羌 活 (Notopterygium incisum TingexH．T．Chang)与 宽 叶羌 活 (NotopterygiumforbesiiBoiss．)的干燥根茎及根，是中、藏、羌医药体系中常用药材。为太阳经引经 之药 ，具有散寒祛风、胜湿止痛之功效，用于风寒感冒、头痛身痛和风寒湿痹导致的肩背酸痛等病的 治疗 。本实验尝试通过对 65种不同来源羌活药材分析测定 ，建立适合羌活的HPLC一荧光光谱检测 的指纹谱分析评价方法，可靠、全面地表征其复杂成分体系。探索建立适合羌活药材荧光成分特点、 灵敏度高、分析速度快、重现性好的多点质控方法，为提高羌活药材及含羌活成药的质量控制水平 提供参考[1]。 2 实验部分 2．1 仪器与试药 岛津 IC一10A高效液相色谱仪(日本岛津公司))RF一535荧光检测器(日本岛津公司)；RF一5000 荧光光度计(日本岛津公司)；HS6150型超声波清洗器 (上海昆山仪器厂)；SartoriusCP225D电子 分析天平 (北京赛多利斯仪器有限公司)。 异欧前胡素(批号：0827—9502)，羌活对照药材(批号：0935—9603)，均购 自中国药品生物制品检 定所 ；羌活药材 (各地收集，经中药鉴定教研室王荣祥教授鉴定)；乙腈 (色谱纯)；乙醇 (分析醇)。实 验用水为蒸馏水。 ① 辽宁省科技厅资助项 目 ② 联系人，电话 ：(0411E_mail：whb—lzy@126．corn 作者简介：王海波(1977一)，男，沈阳市人，讲师，主要从事中药质量分析评价研究工作。 收稿 日期；2009—07—14；接受 日期：2009·09—08 第 2期 王海波等：中药羌活 HPLC一荧光指纹谱研究 2．2 实验方法 2．2．1 羌活指纹谱方法学研 究 2．2．1．1 色谱条件 色谱柱 ：MetachemODS—C18(4．6ramX150)，柱温 ：40~C，流动相 ：乙腈一0．025mol／L磷酸水溶液 (45：55)，流速 ：lmI／min。光谱扫描确定荧光检测条件 ： 一310nm、 =480nm。 2．2．1．2 对照品溶液制备 准确称取异欧前胡素对照品适量，加甲醇溶解 ，制成每 lmL含异欧前胡素 0．7692mg的溶液， 作为对照品母液备用 。根据需要，再适当稀释配成所需浓度。 2．2．13 供试品溶液制备 取过 100目筛的羌活药材粉末 0．5g，准确称量。置于具塞锥形瓶中，加入乙醇 30mI，称重 。超 声 30min，放冷，用乙醇补足原重量。摇匀，滤过，取续滤液经微孔滤膜 (0．45~m)滤过，备用 。 2．2．1．4 测定计算方法 取 65个不同来源羌活样品和独活、白芷 2个伪品(表 1)，按照供试品溶液制备方法制备供试 品溶液 。分别准确吸取对照品溶液和供试品溶