沉默缺氧诱导因子 -1 α对肝癌细胞化疗敏感性影响及相关机理研究.pdfVIP

2·34 · 中国普外基础与临床杂志 2008 年 4 月第 15 卷第 4 期 　Chin J Ba ses Clin General Sur g , Vol . 15 , No . 4 , Ap r . 2008 肝癌 ·基础与实验研究 【文章编号】1007 - 9424( 2008) 04 - 0234 - 06 α 沉默缺氧诱导因子1 对肝癌细胞化疗 △ 敏感性影响及相关机理的研究 刘利平 　陈孝平 　杨盛力 　张万广 　徐 　涛 　金炜东 　梁慧芳 ( ) ( ) α 【摘要】　目的　观察应用短发夹 RN A sh RN A 沉默缺氧诱导因子 H IF 1 对肝癌细胞化疗敏感性的影响 α ( α) 并探讨其相关机理 。方法 　脂质体包裹 H IF1 sh RN A 表达载体 p sh RN AH IF1 转染到肝癌细胞 Hep G2 细胞 α ( ) 中 , G4 18 筛选 ,建立稳定的 H IF1 沉默 的细胞系 , 并 以转染空 白质粒 p H K 作对照 。逆转录聚合酶链反应 ( ) α α ( ) ( ) R TPCR 检测沉默 H IF1 后 H IF1 mRN A 和多药耐药基因 1 mdr 1 mRN A 变化 ; 免疫印迹 West ern blot 检 α ( ) 测细胞 H IF1 及 P糖蛋白 Pgp 的变化 。Co Cl2 模拟缺氧环境下 ,M T T 和流式细胞术检测不同剂量的化疗药物 ( ) α α α 阿霉素 在 H IF1 沉默后对细胞生长抑制率和凋亡率的影响 。结果 　p sh RN AH IF1 转染细胞后 H IF1 干扰 α 率在mRN A水平和蛋白水平分别为 82 . 18 %和 75 . 5 1 % 。沉默 H IF1 后细胞 mdr 1 mRN A 和 Pgp 表达显著降低 ( )