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卷 期 生 物 工 程 学 报
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年 月
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利用长引物嵌套式反向 方法克隆雅致枝霉 脂肪酸脱氢酶基因
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上游序列
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王德培,孙 伟,李明春,魏东盛,张颖慧,邢来君
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Q9*R S/KT/1 FU* Q/1 VW X1CBKG,C QLW S’CBKF/CB YZ9*R [1CBKZ,1 7C3 \W*R V71K+,C
南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津 H###%I
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3#+$4 #$ 5%2 6+7(*+/(*2 (- 8#0*(7#+, 9)$#/#($+, :%$(;#0 %=+*/;%$/ (- 8#0*(7#(,(12 +$5+# ?$#@%*#/2 3#+$4 #$ H###%I !#$+
摘 要 用限制酶 、 分别对雅致枝霉 基因组 进行消化,而后在低浓度条件下利用 连接酶
A0( . ! 5= $ ! 9?H P!J#$ S*9 =S*9
使S*9 自身环化。根据已知基因序列,设计一对长度为HC; 的长反向引物和两对较短的引物,以基因组连接产物为模板,通
$
过三轮嵌套式 反应,获得一长度约为 的扩增片段。经序列测定表明得到了 脂肪酸脱氢酶基因上游序列约为
TG. A5 K
IPHA5,初步序列分析显示该序列为一潜在的启动子序列。
关键词 雅致枝霉,长引物,巢式反向 $
, 脂肪酸脱氢酶
TG. K
中图分类号 文献标识码 文章编号 ( )
]%J 9 I###KH#$I !##$ #K
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