大孔吸附树脂纯化贯叶金丝桃总黄酮的在线检测研究.pdfVIP

维普资讯 第 33卷第 7期 中 国 中 药 杂 志 Vol_33．Issue 7 2008年4月 ChinaJournalofChineseMateriaMedica April，2008 大孔吸附树脂纯化贯叶金丝桃总黄酮的 在线检测研究 赵明波，姜 勇，张洪全，屠鹏飞 (北京大学 药学院，北京 100083) [摘要] 目的：以贯叶金丝桃总黄酮的制备为例，设计一种具有在线检测功能的大孔吸附树脂柱色谱系统。 方法：经过对常规检测方法的比较分析，选择具有流动检测功能的紫外检测器为在线检测器，使用 自制分流器进行 连接，设计了大孔树脂分离纯化中药成分的在线检测系统，并用于贯叶金丝桃总黄酮的纯化。结果 ：在线检测系统 操作简单，检测结果准确客观，制备得到的贯叶金丝桃总黄酮含量可达到90％以上。结论：该技术为中药提取物色 谱纯化的工业化生产提供了简单易行、稳定可靠的在线检测方法，为中药纯化 自动化生产奠定基础。 [关键词】 大孔吸附树脂 ；在线检测；贯叶金丝桃；总黄酮；紫外检测器 [中图分类号】R284．1 [文献标识码】A [文章编号】1001-5302(2008)07-0769-04 大孔吸附树脂被广泛用于中药及天然药物的分 研究所生产；记录仪为3057型记录仪，重庆川仪总 离纯化，尤其是对有效部位或有效成分的富集和纯 厂有限公司重庆川仪四厂生产；分流器 自制。 化方面显示出明显的优势。通过大孔吸附树脂的纯 2 方法与结果 化，往往期望得到纯度较高的产品，因此在实际的工 2．1 在线检测系统的设计 业生产中，对工艺的稳定性、产品的纯度、产率、原料 2．1．1 大孔树脂纯化贯叶金丝桃总黄酮的问题分 的利用率等方面都提出了较高要求，需要对整个树 析 在贯叶金丝桃总黄酮制备过程中，大孔吸附树 脂纯化工艺进行精细的全程监控。目前常规的质量 脂纯化的具体步骤是：贯叶金丝桃提取物的水溶液 监控方式主要依赖经验，辅助以简单的薄层色谱法， 部分徐徐注入 已处理好的 D101大孔树脂柱 中，先 这些方法很难保证工艺的重现性和产品的质量，同 用 1BV的水洗脱，弃去水洗脱液，再用 1．5BV的 时也难 以实现工程化和 自动化。建立能够在线检测 20％乙醇洗脱，弃去20％乙醇洗脱液，最后用40％ 的大孔树脂柱色谱系统，是当前中药工业中迫切需 乙醇洗脱，收集2BV的40％乙醇洗脱液，回收乙醇 要解决的问题。本研究设计并建立了一种大孔树脂 并浓缩即得。 在线检测系统，为工业化生产提供了一种简单易行， 在该方法中，对大孔树脂进行洗脱时，先采用水 准确可靠的检测技术。 洗脱 ，除去未能被树脂吸附的杂质，如糖、氨基酸、多 1 材料与试剂 肽等水溶性杂质，洗脱液由最初的浑浊胶体样溶液 贯叶金丝桃提取物购 自北京金可生物添加剂有 变为澄清溶液，现象十分明显，很容易掌握水洗脱终 限公司。大孔树脂 DIO1购 自天津海光化工有限公 点。水洗脱后，改用20％乙醇进行洗脱，主要是除 司，含量测定用芦丁对照品购 自中国药品生物制品 掉大极性非黄酮苷类杂质，由于大量的20％乙醇也 检定所，批号为0080．9705。乙醇为分析纯试剂。紫 能洗脱下黄酮苷类成分，如何控制20％乙醇的洗脱 外分光光度计 (uV一2401PC，Shimadzu)。 终点，既保证除去杂质，又不损失 目标成分，是该纯 在线检测系