操纵元（operon）的基本组成.pdfVIP

操縱元(operon)的基本組成 乳糖操縱元模型被而後的許多研究實 驗所證實，對其有了更深入的認識，並且發 現其他原核生物基因調控也有類似的操縱 元組織，操縱元是原核基因表現調控的一種 重要的組織形式，大腸桿菌的基因多數以操 縱元的形式組成基因表現調控的單元。下面 就以半乳糖操縱元爲例子說明操縱元的最 基本的組成元件（elements）。 (一)結構基因群 操縱元中被調控的編碼蛋白質的基因可稱爲結構基因(structural gene, SG)。一個操 縱元中含有2 個以上的結構基因，多的可達十幾個。每個結構基因是一個連續的開放讀 框(open reading frame), 5’端有轉譯起始碼(DNA 儲存鏈上是ATG，轉錄成mRNA 就是 AUG)，3’端有轉譯終止碼(DNA 儲存鏈上是TAA、TGA 或TAG，轉錄成mRNA 就是 UAA、UGA 或 UAG)。各結構基因頭尾銜接、串連排列，組成結構基因群。至少在第 一個結構基因5’側具有核糖體結合位點(ribosome binding site, RBS)，因而當這段含多 個結構基因的DNA 被轉錄成多順反子mRNA，就能被核糖體所識別結合、並起始轉譯。 核糖體沿mRNA 移動，在合成完第一個編碼的多後，核糖體可以不脫離mRNA 而繼 續轉譯合成下一個基因編碼的多，直至合成完這條多順反子 mRNA 所編碼的全部多 。 乳糖操縱元含有ｚ、ｙ和ａ3 個結構基因。 ｚ基因長 3510bp，編碼含 1,170 個氨基酸、分 子量爲 135,000 的多，以四聚體形式組成有 活性的β -半乳糖苷酶 ，催化乳糖轉變爲別乳 糖(allolactose)，再分解爲半乳糖和葡萄糖；ｙ 基因長 780bp，編碼有 260 個氨基酸、分子量 爲30,000 的半乳糖滲透酶 ，促使環境中的乳糖 進入細菌；ａ基因長825 bp，編碼275 氨基酸、 分子量爲32,000 的轉乙醯基酶 ，以二聚體活性 形式催化半乳糖的乙醯化。ｚ基因 5’側具有 大腸桿菌核糖體識別結合位點（ribosome binding site，RBS）特徵的Shan-Dagano(SD)序 列，因而當乳糖操縱元開放時，核糖體能結合 在轉錄産生的 mRNA 上。由於ｚ、ｙ、ａ三個基因頭尾相接，上一個基因的轉譯終止 碼靠近下一個基因的轉譯起始碼，因而同一個核糖體能沿此轉錄生成的多順反子 3 陳世明 整理 （polycistron）mRNA 移動，在轉譯合成了上一個基因編碼的蛋白質後，不從mRNA 上 掉下來而繼續沿 mRNA 移動合成下一個基因編碼的蛋白質，一氣喝成依次合成這基因 群所編碼所有的蛋白質。 (二啓) 動子 啓 動子(promoter, P)是指能被RNA 聚合酶 識別、結合並啓 動基因轉錄的一段DNA 序列。操縱元至少有一個啓 動子，一般在第一個結構基因 5’側上游，控制整個結構基 因群的轉錄。 用RNA 聚合酶 與分離的一 段DNA 雙鏈混合，再加入外切 核酸酶 去水解 DNA，結果只有 被RNA 聚合酶 識別結合而被保 護的那段DNA 不被水解，由此 可以測出啓 動子的範圍及其序 列。雖然不同的啓 動子序列有所 不同，但比較已經研究過的上百 種原核生物的啓 動子的序列，發 現有一些共同的規律，它們一般 長 40-60 bp，含 A