防风固沙植物菊芋的酶降解机制研究.pdf

致 谢 本论文是在吴祥云教授的精心指导和关心下完成的，在论文付梓之际，特表示 衷心的感谢和诚挚的敬意!感谢导师实验过程中给予无微不至的关心和照顾，为我提 供宽松开放的学习环境以及科研锻炼机会。在课题的选择、实验的设计、进度的安 排以及论文的撰写过程中无不凝聚着导师大量的心血，从中我不仅对科学研究的认 识和思路有了更深入系统的了解，而且也学到诸多为人处世的道理。导师渊博的知 识、敏捷的思维、严谨的治学态度和忘我的工作精神是我学习的榜样；导师豁达的 性格，积极乐观的生活态度更将使我受益终身，在此对导师表达最诚挚的敬意! 感谢生物实验室的刘民老师、孔涛老师、张明阳老师，感谢他们在试验过程中 提供的方便条件。 感谢同届研究生们，他们在实验过程中给予了我很大的帮助，他们让我在一个 团结奋进、朝气蓬勃的集体中学习和生活，这将是我今后人生道路上永远的财富。 向辽宁工程技术大学所有关心帮助过我的人一并表示最诚挚的谢意! 摘 要 菊芋为菊科向日葵属多年生草本植物。其菊芋适应性强，生长旺盛，具有优良的 防风固沙、保持水土的生态性能。菊芋块茎富含菊糖，是发酵工业潜在的碳源。菊 糖经菊粉酶降解可生产果糖或低聚果糖，也可用来发酵生产酒精、有机酸等产品。 本研究以菊粉、甲基丙烯酸缩水甘油酯（GMA ）、四甲基乙二胺（TMEDA ）和活 性染料为主要原料，通过接枝聚合制备菊粉凝胶，再经染色，制成不溶性呈色菊粉。 以此菊粉为培养基唯一碳源从土壤中分离出 12 株产菊粉酶微生物，其中 1 株酶活 力最高，鉴定为黑曲霉；以其为出发菌株，复合诱变选育出 1 株高产菊粉酶菌株 AU-55 ；单因素试验和正交试验设计优化的 AU-55 发酵产酶条件为，菊芋汁 250.0mL •L-1 ，玉米浆 20.0 g •L-1 ，NH H PO 5.0 g•L -1 ，MgSO •7H O 0.5 g•L -1 ，NaCl 3.0 g•L ， 4 2 4 4 2 初始 pH 值 6.5 ，接种量 35 g •L-1 时，在 30 ℃，200r/min 摇瓶培养 4d 产酶量最高， 达 42.3U •mL-1 ；菊芋汁酶法降解最优条件为：pH4.5 ，底物浓度 10%，加酶量 12%， 45 ℃下，酶解时间 14h，水解率达 97% 以上。 关键词：菊芋；生物降解；菊粉酶；发酵条件；菊糖 - I - Abstract Jerusalem artichoke belongs to helianthus genus. It has excellent ecological capacity of windbreak and sand-fixation because of its Wide adaptability to environment and good growth. Inulin rich in Jerusalem artichoke root is the potential carbohydrate source in fermentation industry. Inulin can be broke down into fructose or fructo-oligo-saccharides by inulinase and the product can be fermented into alcohol, organic acid. Insoluble chromogenic inulin gel was made through graft polymerization and staining with inulin, Glycidyl methacrylate(GMA) ， tetramethylethylenediamine （TMEDA ）and act