orexinA和OX1R在新生鼠与成年鼠延髓分布比较.pdfVIP

* orexinA 和 OX R 在新生鼠与成年鼠延髓分布的比较 1 宁穗，宋娜娜，刘自兵，李莉，曹银祥，钱源，朱大年，沈霖霖 复旦大学上海医学院生理与病理生理学系，上海(200032) Email:llshen@ 摘 要： 本文研究 orexinA(OXA)和 orexin1 型受体(OX1R)在新生鼠与成年鼠的延髓分布及 比较。新生大鼠(1-5d) ，成年(6-8w)SD 大鼠，取其延髓，采用免疫组织化学方法和图像分析 技术，观察 OXA 和 OX1R 在新生鼠与成年鼠的延髓的分布。结果显示 OXA 免疫反应阳性 纤维和 OX1R 免疫反应阳性细胞在新生和成年 SD 大鼠延髓有广泛分布，都主要在延髓腹外 侧区(ventrolateral medulla, VLM)和舌下神经核(hypoglossal nucleus, XII)分布比较明显。在这 两个区域，新生鼠组的 OX1R 免疫反应阳性细胞的相对光密度值均低于成年鼠组(P0.001)。 结果表明随着大鼠发育成熟，OX1R 表达水平增加，可能与其生理功能完善有关。OXA 免 疫反应纤维和 OX1R 免疫反应阳性细胞在延髓的 VLM 和 XII 的表达提示可能与心血管和呼 吸活动的调节有关。 关键词： orexinA ，orexin 1 型受体，免疫组织化学，大鼠，延髓 中图分类号：R332.3 1．引言 [1] 1998年，Sakurai T等 在下丘脑中发现了两种与进食有关的新的神经肽：orexinA(OXA) 和orexinB(OXB) ，由于当时观察到其作用与瘦素(Leptin) 的作用相反，而命名为增食因子。 研究发现orexin神经元特异性分布在下丘脑，包括穹隆周区、下丘脑外侧区、背中核等[1-2] 。 orexin通过作用于G蛋白耦联受体(G protein-coupled cell surface receptors, GPCRs)发挥作用。 其受体有两种亚型：增食因子1型受体(orexin type 1 receptor, OX R)和增食因子2型受体 1 (orexin type 2 receptor, OX R)，这两种受体亚型表达几乎遍及整个脑部，提示orexin 的生理 2 活性并不只是公认的促进摄食。后来的研究发现，orexin除了比较公认的促进摄食的作用外， 还可影响能量代谢、内分泌、呼吸、睡眠-觉醒、心血管活动和觉醒维持等多种生理活动[3-5] 。 众所周知，延髓是心血管活动和呼吸调节的重要中枢。由于orexin神经元的投射途径和其受 体在中枢神经系统中的分布尚不完全清楚，orexin受体在新生鼠延髓的表达也鲜见报道，故 本研究使用免疫组化的方法对OXA和OX1R在新生和成年SD大鼠延髓分布进行观察和比较， 为深入了解延髓的OXA和OX1R在心血管活动和呼吸调节中的作用奠定形态学基础。 2 ．材料和方法 2.1. 材料 2.1.1 实验动物 SD 大鼠(复旦大学上海医学院实验动物中心和中科院实验动物中心) 。 2.1.2 仪器 CM 1900 型 LEICA 冰冻切片机(德国 LEICA 公司) ；LEICA DMLB 显微镜 (德国 LEICA 公司) ；LEICA DC300F 成像系统(德国 LEICA 公司) 。 * 本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金（项目编号：20040246051 ，D.N. Zhu ）和国家自然科学基 金（项目编号L.L. Shen ）的资助。 - 1 - 2.1.3 主要试剂