CD 40激发肿瘤抗原特异性DCs对CIK细胞生物学活性的影响.pdfVIP

维普资讯 肿瘤 2007年 12月第27卷第 12期 TumorVo1．27，No．12，December，2007 ·953 · U~ic：Researchl基础研究 CD40激发肿瘤抗原特异性 DCs对 CIK细胞生物学活性的影响 杨新静 ，黄建安 ，穆传勇 ，陈 成 ，张学光。 (1．苏州大学附属第一医院呼吸内科，江苏省I临床免疫学重点实验室，苏州 215006；2．苏州大学生物技术研究所，苏州 215006) [摘要] 目的：研究cD40激发凋亡肿瘤细胞致敏的树突状细胞(dendriticcells，DCs)对细胞 因子诱导杀伤(cytokine．induced killer，CIK)细胞的细胞表型、增殖活性及细胞毒活性的影响。方法：常规方法从健康人外周血单个核细胞 中诱导DCs和CIK 细胞，采用凋亡肿瘤细胞负载DCs，并用或不用激发型CD40单克隆抗体 (CD40mAb)激活DCs成熟；成熟DCs与同源的CIK 细胞共育5d，分别获得DC40Ag-CIK细胞及DcAg-CIK细胞；观察细胞增殖活性；流式细胞仪检测细胞表型；酶联免疫吸附实验 (enzyme—linkedimmunosorbentassays，ELISA)法检测细胞培养上清液 中IFN一 的含量；[H]一TdR掺入法测定细胞杀伤活性。 结果 ：凋亡肿瘤细胞负载激发可使DCs上调表达 CDIa、CD80、CD86、CD83、HLR．DR，联合 CD40mAb激发可进一步促进 DCs成熟；培养至第 l4天时，DC40Ag-CIK细胞、DcAg-CIK细胞 、CIK细胞分别扩增(18．2±1．7)倍 、(15．0±1．2)倍、(9．3±1．8) 倍；DC40Ag-CIK细胞 中的CD3CD56 比例较DCAs-CIK细胞和 CIK细胞明显上调(P0．05)；DC40 CIK细胞、DCAs-CIK细胞 对A549杀伤活性强于CIK细胞(P0．05)，并且 DC40Ag-CIK细胞强于 DcA,-CIK细胞 (P0．05)；CIK细胞、DcA,-CIK细胞、 DC40Ag-CIK细胞培养上清液中IFN一 的含量递增，分别为 (1494．7±246．3)pg／mL、(2706．3±197．0)pg／mL、(3676．3± 335．0)pg／mL。结论 ：与单独凋亡肿瘤细胞负载的DCs相比，CD40 激发的凋亡肿瘤细胞负载的DCs可进一步提高 CIK细胞 的增殖活性及细胞毒活性。 [关键词] 抗原，肿瘤；树突细胞；细胞因子；杀伤细胞；细胞凋亡；抗原，CD40 [中图分类号] R73—36 [文献标识码] A [文章编号] 1000-743l(2007)12-0953-04 EffectsofCD 40-pulsedtumorspecificdendriticcellsonbiololgicalactivityofcytokine-inducedkillercells YANGXin—jing，HUANGJian—an，MUChuan—yong，CHENCheng，ZHANGXue—guang (1．DepartmentofRespiratory Medicine，FirstHospitalAffiliatedtoSoochow University，KeyLaboratory ofMedicineandClinical Immunology ofJiangsu Province，Suzhou2l5006，China；2．InstituteofMedicalBiotechnology，SoochowUniversity。Suzhou215O06，China) [ABSTRACT] Objeetive：Toinvestigatethechangesofphenotypes，proliferationactivityandcytotoxicityofcytokine—inducedkiller (CIK)cellsafterco—culturedwithautolog