PCR和定量PCR引物和探针设计.pdfVIP

下载本文档

12
0
约 9页
2017-08-30 发布于安徽
举报
版权申诉

PCR和定量PCR引物和探针设计.pdf

1、本文档共9页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

引物和探针设计 – PCRPCR 目录 1 2 4 7 基本原理 DNADNA 3-DNA3-RNA RNADNARNA DNA PCRRTDNA PCR PCR PCRPCRRT-PCRPCR) DNARNARNA SNP) 1 引物设计的重要因素 3 Primer () 引物长度和专一性 18-3015 PCR 平衡GC含量，避免GC-和AT-富集区域 GC40%60%- dC -dG - - dA-dT-- 退火温度 Tm “2+4” 14ATDNA 2°C GC4°C Tm = 2 °C • (A + T) + 4 °C • (G + C) GC13 - (G + C 16.4) Tm = 64.9 °C + 41 °C • (A + T + G + C) 50 nM50 mM Na+ pH 7.0 “”Na+ C + G 820 + Tm = 100.5 °C + 41 °C • • 16.6 • log10([Na ]) A + C + G + T A + C + G + T “”HS 提示 55°C65°C 2 引物设计的重要因素避免互补的引物序列 3 3 PCRPCR PCR1 A 5’ ACGGATACCA TGCCTAT G 3’ 5’ ACGGATACCA TGCCTA TG 3’ B 5’ ACTTGCATGTCTAGTCAC 3’ 3’ CAGTGAGTTACATGACTG 5’ 图 1 A B 3’-序列 PCR33G-C- PCR-3G/C 3 针对特殊应用的其他提示逆转录(RT-PCR) RT-PCR mRNADNA 2 2A DNAPCRmRNA DNA mRNA mRNA-DNA 2B A PCR product Intron 1 Genomic DNA Exon 1 Intron