HPLC法测定何首乌中二苯乙烯苷的含量.pdfVIP

维普资讯 内蒙古中医药 HPLC法测定何首乌中二苯乙烯苷的含量 李亚林 ’ 张 浩一 摘 要 ：目的：建立采用HPLC测定何首鸟 中二苯 乙烯苷的含量。方法 ：色谱柱 ：014DiaraomilTM (钻石)C18色谱柱 (4，6× 250mm，5脚 )；流动相：乙腈一水 (25：75)；流速：1．0ml／min；检测波长：320nm；柱温：25℃。结果 ：2，3，5，4 一‘四羟基二 苯乙烯一2～o—B—D一葡萄糖苷的平均回收率为 9o％RSD为 1．07％。结论 ：该方法简便、准确，可用于测定何首鸟 中二．苯乙烯苷 的含量 。 关键词：何首鸟；二苯 乙烯苷 ；含量测定 中图分类号 ：R284 文献标识码 ：B 文章编号：1006—0979 (2007)12—0024—02 何首乌为蓼科植物何首乌PolygonumThumb．的干燥块 根。何首乌主要含蒽醌类化合物，其中主要为大黄酚、大黄 索 (Ernodin)、大 黄 酸，其 次 为痕 量 的大黄 索 甲醚 (Physcion)及其糖菅和大黄酚葱酮等，另含淀粉 45．2％， 粗脂肪3．1％，卵磷脂3．7％。其含量测定指标是大黄素和 二苯乙烯菅，现选二苯乙烯苷作为含量测定的指标。 1 样品、试剂及仪器 样品：何首乌药材细粉 对照品：由中国药品生物制品检定所提供。 2，3，5，4-四羟基二苯乙烯一2一O一口一D一葡萄糖苷 (供 含量测定用 。批号：0844—200003。简称 “二苯乙烯苷”)。 所用试剂 ：水为去离子水，其他试剂均为分析纯或色谱纯。 测定仪器 ：岛津2010型液相色谱仪。 2 方法学考察 2．1 色谱条件：用DiamonsilTM (钻石)C18色谱柱 (4，6× 250mm，5tan)；乙腈一水 (25：75)为流动相，流速 1，0ml／ min，检测波长320nm，柱温25±I*C，理论板数按2，3，5，4． 图1 保留时间及分离度 四羟基二苯乙烯 一2一O—B—D一葡萄糖苷计算应不低于2000。 此条件下2，3。5，4-四羟基二苯乙烯一2一O一口一D一葡萄糖苷 保留时间为7，45rain(见图 1)，与其它组分均能达到较好分离 (见图2)，阴性对照样品对2，3，5，4一四羟基二苯乙烯一2一O — B—D一葡萄糖苷测定无干扰。 2．2 线性关系考察：精密称取 2，3，5，4 一‘四羟基二苯乙烯 一 2一O一口一D一葡萄糖苷对照品2，5rng置于25rnl棕色量瓶中， 用甲醇溶解并稀释至刻度 ，摇匀，分别吸取溶液 0，5、1．0、 2．0、3．0、6．0ml于 10rnl棕色量瓶中，用 甲醇溶解并稀释至刻 度，经 0．45pan滤膜过滤 ，即得浓度分别为 5．0ug／ml、10．0ug／ rnl、20．0ug／ml、30．0ug／ml和60，0ug／ml的2，3，5，4 一‘四羟 基二苯乙烯 一2一O一口一D一葡萄糖苷对照品溶液，分别吸取 10 进样，测定色谱峰面积，以所得峰面积为纵坐标，2，3， 5，4 ‘四羟基二苯乙烯一2一O—B—D一葡萄糖苷浓度为横坐标 绘制标准曲线，计算得 回归方程。 *重庆医科大学附属第--N院 (400010)；**中国人民解放军第 图2 阴性干扰 三二四医院 (400020) 2007年 10月 8日收稿 维普资讯 2007年 12期 25000~0 3 何首乌的含量测定 2000000 3．1 对照品溶液的制备 ：精密称取在干燥皿 中干燥至恒重的2， 叫 15000~0