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饲料粗蛋白质测定方法探讨摘要随着饲料业的迅速发展，粗蛋白质是饲料检测中重要的组成成分，也是必检项目之一，而采用国家标准方法即凯氏法测定样含氮量来计算粗蛋白质量。但其方法的缺点是样品消化时间长，试剂用量大。在检测过程中，我们对试样的消煮过程进行了改进，减少了试样取样量，试剂加入量并缩短了消煮时间，这样有效的改进以上原方法存在的问题。关键词饲料加工 粗蛋白 检测 组成成分 消化时间饲料中粗蛋白质的测定是饲料品质鉴定的重要检测项目，我们采用国家标准方法即凯氏法测定式样含氮量，乘以氮与蛋白质的换算系数6.25计算粗蛋白质量。在检测过程中，我们对试样的消煮过程进行了改进，减少了试样取样量，试剂加入量并缩短了消煮时间，然后采用相同的半微量蒸馏法，对试样进行检测，实验如下。1.样品、仪器与试剂1.1样品来源 样品来源饲料厂和养殖户送检的大量样品中抽检20个样品。1.2仪器蒸汽发生器、安全管、导管、汽水分离器、样品入口、反应管、冷凝管、吸收瓶1.3 试剂 硫酸铜、硫酸钾、硫酸、 2%硼酸溶液、40%氢氧化钠溶液、0.025mol/L硫酸标准溶液或0.05mol/L盐酸标准溶液。混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。 2.方法采用GB 6432－86粗蛋白质测定放大和改进后的方法分别对20个样品进行检测对比。具体步骤如下：2.1 操作 实验组称取0.2g样品，移入干燥的100ml定氮瓶中，硫酸铜，无水硫酸钾按1:10混合，加入6毫升硫酸，稍摇匀后在瓶口放一漏斗，将瓶倾斜45度角支在有小孔的石棉网上，小火加热，待瓶内的容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5小时[1]。取下加入20ml水，放冷后，移入100ml容量瓶中，用少量的水洗定氮瓶，洗液倒入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。 对照组称取1g样品，移入干燥的100ml定氮瓶中，加入25毫升硫酸，硫酸铜0.9g，无水硫酸钾15g。其方法同上，只是继续加热时间为2小时[2]。 2.2 氨的蒸馏 采用半微量蒸馏法，滴定，其他操作程序一律按照GB 6432－86粗蛋白质测定方法进行测定，结果计算均相同。3.测定结果及分析经分析计算，结果对照如下表：实验结果对照表由表可以看出，实验组与对照组指标很接近，虽然对照组整体略高于实验组，但二者差异不显（P＞0.05）。整个实验，虽然对照组整体略高于实验组，但二者差异不显（P＞0.05）。在检测过程中，由于对试样的消煮过程进行了改进，不但减少了试样取样量和试剂加入量，而且也缩短了消煮时间，改进后的实验更加实用也值得推广[3]。4.小结由于粗蛋白质测定过程相对比较复杂（测定需3—5小时），在实际检测时应注意以下几点：4.1 化时应在凯氏瓶中加几粒玻璃珠，以防止化时硫酸暴沸液体溅失，并在凯氏瓶口放一小漏斗使蒸汽凝结回流，这样能使化完全。4.2硝化要用小火，待样品焦化，泡沫后，逐步加强火力，化过程中要经常转动凯氏瓶，这样能够使化完全均匀。将溅到瓶壁上的黑渣全部浸入凯氏烧瓶底部的硫酸溶液里，以避免化不完全[4]。4.3样品停止加热后，如果冷却时间过长容易引起硫酸样液凝结不易溶解，冷却至不烫手加入少量蒸馏水（约20mL），并摇动凯氏瓶，移入容量瓶中，冷却，定容。在水与热硫酸的剧烈反应时要注意凯氏瓶破裂。4.4 样液加入蒸馏装置后，先用棒状玻璃塞封口，并加水密封，防止漏气[5]。滴定用的盐酸标准滴定溶液必须准确，使用前应摇动溶剂瓶，溶液浓度均匀。滴定时注意排滴定管底部的气泡，确保滴定结果准确。参考文献[1]王康，董宽虎.饲料中粗蛋白质和钙含量测定方法的探讨饲料广角 2006（15）. [2]孙晓燕，于长林.饲料中粗蛋白质快速测定方法的探讨.企业标准化.200815）. [3]严梅荣.饲料粗蛋白快速测定法研究粮食与饲料工业. 200210）. [4]王潍波不同测定方法对饲料粗蛋白测定结果影响的研究.饲料与畜牧200812）. [5]程彦伟，李培睿，李宗义，李学梅.饲料粗蛋白含量分析方法比较.饲料工业. 200111）. 魏玉成（1973.11—），男，汉，山东日照人，本科，畜牧师，从事畜牧生产工作。