C1QBP基因在绒毛膜癌耐药细胞株中的表达及其与耐药的关系.pdfVIP

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C1QBP基因在绒毛膜癌耐药细胞株中的表达及其与耐药的关系.pdf

·616· .基础研究. C1QBP基因在绒毛膜癌耐药细胞株中的 表达及其与耐药的关系 沈晓燕韩冰沈芸杨隽钧任彤 沙桂华 向阳 【摘要】 目的检测补体成分1Q亚成分结合蛋白(C1QBP)基因在绒毛膜癌(绒癌)耐药细胞株 及其亲本细胞株中的表达差异,探讨以C1QBP基因为靶向的RNA干扰能否有效逆转绒癌耐药细胞株 对相应化疗药物的耐药性。方法(1)通过实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法和细胞免疫荧光法 检测绒癌耐药细胞株,即氟脲嘧啶脱氧核苷(FUDR)耐药细胞株JeG.3/FUDR、甲氨蝶呤(MTx)耐药 细胞株JeG.3/MTX、依托泊苷(VP一16)耐药细胞株JeG一3/VP、放线菌素D(ACTD,又称KSM)耐药细 胞株JeG.3/KSM细胞,以及亲本细胞株JeG.3细胞中c1QBPmRNA和蛋白的表达及蛋白定位。(2)靶 向构建C1QBP基因的短发夹状RNA(shRNA),包装成C1QBP基因RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体, 即C1QBP.RNAi—LV,转染绒癌耐药细胞,实时荧光定量PCR技术及蛋白印迹法检测转染后绒癌耐药 mRNA和蛋白的表达,活细胞计数(CCK一 细胞株JeG一3/FUDR细胞和亲本细胞株JeG.3细胞中C1QBP 8)法检测各绒癌耐药细胞的药物敏感性的变化。结果 (1)转染前绒癌耐药细胞株JeG.3/FUDR、 mRNA表达水平分别为2.520_+0.680、1.770_+0.230、 JeG.3/MTX、JeG.3厂vP、JeG.3/KSM细胞中C1QBP 1.940-+0.090、1.740+0.350,均明显高于亲本细胞株JeG一3细胞(为1.000),差异均有统计学意义(P 0.05)。4种绒癌耐药细胞中C1QBP蛋白表达强度均高于亲本细胞株JeG.3细胞;绒癌耐药细胞和亲 本细胞中均存在C1QBP蛋白的表达,均定位于细胞内的线粒体。(2)转染后绒癌耐药细胞株JeG.3/ FUDR细胞中C1QBPmRNA表达水平下调了93.1%fP0.01),C1QBP蛋白表达完全被抑制。(3)转染后 绒癌耐药细胞株JeG一3/FUDR、JeG.3/MTX、JeG一3/VP和JeG一3/KSM细胞的耐药指数较其相应RNAi阴 性对照分别下降了86.3%、93.9%、92.8%和89.9%,差异均有统计学意义(P0.05)。结论C1QBP基 因在绒癌耐药细胞株中表达明显增高,沉默C1QBP基因表达可以有效逆转绒癌耐药细胞株对相应化 疗药物的耐药性。 【关键词】绒毛膜癌; 载体蛋白质类;线粒体蛋白质类; 细胞系,肿瘤;抗药性,肿瘤; RNA干扰 of anditscorrelationwith resistanceinhumanresistance ExpressionCIQBPgene drug choriocarcinomacellline Shen Guihua, Xiaoyan,HanBing,ShenYun,№昭Junjun,RenTong,Sha ofObstetricsand UnionMedical Xiang玩愕.Department Gynecology,PekingCollegeHospital,Chinese 100730,China AcademyofMedicalSciences,Beijing Correspondingauthor:XiangYang,Email:xiangy@pumch.cn Toexaminethe 1 【Abstract】ObjectivecomplementcomponentQsubcomponent—bindingprotein 1 inhumanresistancechoriocarcinomacelllinesandits cellline fCQBPlgeneexpre

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