EB病毒相关淋巴母细胞样细胞系的建立及鉴定.pdfVIP

分子诊断与治疗杂志 2010年 1月第2卷第 1期 JMolDiagnTher,January2010，Vo1．2No．1 论 著 EB病毒相关淋巴母细胞样细胞系的建立及鉴定 张彦 冯哲玲 熊建军 王嘉励 杨光 朱振宇 [摘 要】 目的 由于EB病毒与肿瘤的关系极为复杂且存在争议，淋 巴母细胞样细胞系LCLs (1ymphoblastoidcelllines)没有肿瘤形成过程中的复杂因素，从而成为了研究EBV介导的细胞永生化的最佳 模型。本实验 旨在建立EBV原型株相关的永生化淋巴母细胞系，为后期LCLs的端粒酶活性及其体内外成 瘤性的相关研究提供基础。 方法 利用体外培养B95．8细胞产生EB病毒原型株感染正常人外周血淋巴 细胞培养传代得到5株EB病毒相关淋巴母细胞 ，并用RT-PCR对其进行了基因表达 、流式细胞仪进行细胞 表面标记以及核型的鉴定。 结果 淋巴母细胞样细胞系能不断传代 ，能表达EBV基因，具有成熟B细胞 表面标记 ；细胞传代过程早期未发生核型改变。 结论 建立 了5株永生化细胞株 ，分别为LCL1—5、 LCL2—5、LCL3—5、LCL4—30、LCL5—30。 关【键词]EB病毒；永生化；转化细胞系；淋巴细胞 DevelopmentandidentificationoflymphoblastoidcelllinesassociatedwithEpstein-Barrvirus ZHANGYan，FENGZheling，XIONGJianjun，WANGJiali，YANGGuang，ZHUZhenyu (1．MaternalandChildHealthHospitalofGuangdongProvince，Guangdong，Guangzhou510010，China；2． DepartmentofBiochemistry,ZhongshanM edicalCollegeofSunYat-senUniversity,Guangdong，Guangzhou 510080，China) A【BSTRACT】 Objective TherelationbetweenEpstein-Barrvirusandtumoriscomplicatedand disputable．Lymphoblastoidcelllines(LCLs)havebecomethebestmodelinthestudiesontumorgenesisandcell immortalizationassociatedwithEBV becauseofitsrelativelysimpleprocess，furthermoresomecharactersofB lymphocytemakeLCLsimportantintheresearchesinimmun ology．Inthispaper,weaimedtodevelopLCLs associatedwithEBV tocarryonourfollowingexperimentsonthetelomeraseactivity andtumorgenesisinvivo andinvitro． Methods NormalperipheralbloodlymphocytesweretransformedwithEBVprotoytpeproduced by B95．8 cell；LCLswere identified in geneexpression ofEBV by RT-PCR，andcellsurfacemarkerand karyotypewerealso detected． Results 5strainsof LCLscould be subcultured continently withnomr al karyote，EBV associatedlatentmembraneproteingeneandCD19couldbedectedinallofhtefivecelllines． Conclusion fivestrainsofLCLsweredevelopedandnamedrespectivelywith LCL1．5、LCL2．5、LCL3—5、 LCL4—3O、LCL5—30． K【EYWORDS】 Epstein—Barrvirus；Immortalization；Trn