通心络胶囊干预载脂蛋白E基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化形成机理的.docVIP

通心络胶囊干预载脂蛋白E基因敲除小鼠MMP-1、MMP-9及TIMP1的研究 Study of Tongxinluo Capsule in Intervention of Apolipoprotein E Gene Knocking Out MMP-1, MMP-9 and TIMP1 in Mice 韩 旭 李七一 夏卫军 赖仁胜 陈小虎 郭宏敏 赵 惠 Han Xu, Li Qiyi, Xia Weijun, Lai Rensheng, Chen Xiaohu, Guo Hongmin, Zhao Hui 江苏省中医院（中国 210029） Traditional Chinese Medicine Hospital in Jiangsu Province ( China, 210029) 中图分类号：R285.6 文献标识码：A 文章编号：1818－0086（2010）04 摘 要：目的 通过通心络胶囊对载脂蛋白E基因敲除〔ApoE（-/-）〕模型组小鼠基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）水平等指标的干预变化，探究其治疗冠心病（CHD）的机理。将40只ApoE （-/-）小鼠作为实验组，建立冠状动脉粥样硬化（AS）模型，随机分为模型组等5组，分别给予辛伐他汀及不同剂量的通心络胶囊进行干预，另选8只同系的小鼠作为正常对照组。通过对模型组小鼠血清MMP-1、MMP-9 和TIMP1水平的观察，比较分析通心络胶囊对ApoE （-/-）小鼠冠状AS的调节作用并探讨其机理。　通心络胶囊高剂量组小鼠血清MMP-1和MMP-9水平均低于模型组，而TIMP1水平高于模型组，与模型组相比，均有统计学意义（P0.05或P0.01）。通心络胶囊中剂量组小鼠血清MMP-9水平低于模型组，与模型组相比有统计学意义（P0.05）。　通心络胶囊具有抑制血管重构和稳定斑块的作用。 通心络胶囊；ApoE（-/-）小鼠；冠状AS；MMP-1；MMP-9；TIMP1；干预 1.1 药品与试剂 MMP-1、MMP-9、TIMP1测定试剂盒，购自晶美生物工程有限公司，美国Oriono Diagostica公司生产，批号：00604。 胆固醇，上海生化试剂厂，批号：051124。 1.2 实验动物　ApoE（-/-）小鼠，40只，鼠龄8周龄，雌雄各半，体重18-22g。（品系C57BL/6J，购自美国Jackson实验室）由北京大学实验动物中心提供。同遗传背景C57BL/6J小鼠8只，鼠龄8周龄，雌雄各半，体重18-22g。动物生产许可证号： SCXK（京） 2002-0001。南京中医药大学实验中心，实验动物使用许可证：SYXK（苏）2002-0123。 1.3 实验仪器 SYSMAX全自动生化分析仪 日本SYSMEX公司 TGL·16G台式高速离心机 上海医用分析仪器厂 UN—754分光光度计 上海第三分析仪器厂 JA2003分析天平 上海天平仪器厂 AUP-2-35G-01 实验室级专用超纯化水机 重庆颐洋实业有限公司 DKZ—2型电热恒温振荡水槽　　　　　　上海精宏实验设备有限公司 LDZ5—2低速自动平衡离心机 北京医用离心机厂 LRB--12752计数器 芬兰 1.4 实验条件　小鼠单笼饲养，自由饮水，室温20±2℃。 2.1 高脂饲料配制方法　以5%胆固醇，10%猪油，0.1%丙基硫氧嘧啶，加入小鼠标准饲料粉中。饲料粉经充分混合后由江苏省青龙山动物养殖场加工成颗粒饲料。 2.2 ApoE（-/-）小鼠冠状动脉粥样硬化建立　ApoE（-/-）小鼠适应性喂养一周后给予高脂饲料，连续喂养12周。同时选取相同遗传背景的8周龄正常C57BL/6J小鼠8只，雌雄各半作为正常对照组， 2.3 给药方法和剂量　 2.3.1 正常对照组 喂普通颗粒小鼠饲料，同时给予等量蒸馏水。 2.3.2 模型组：喂高脂饲料，同时给予等量蒸馏水。 2.3.3 通心络胶囊1组 除与模型对照组相同外，给予通心络胶囊2g（生药）/kg体重。 2.3.4 通心络胶囊2组 除与模型对照组相同外，给予通心络胶囊4g（生药）/kg体重。 2.3.5 通心络胶囊3组 除与模型对照组相同外，给予通心络胶囊8g（生药）/kg体重。 2.3.6 辛伐他汀组 除与模型对照组相同外，给予辛伐他汀0.05g/kg体重。 2.4　血清MMP-1、MMP-9、TIMP1 浓度水平测定　采用定量夹心酶免疫分析技术。 描述性统计分析，定性指标以频数表，百分率或构成比描述；定量指标以均数，标准差描述。两组对