颅内海绵状血管瘤CCM1基因突变分析.pdf

颅内海绵状血管瘤CCMl基因突变的分析 中文摘要 颅内海绵状血管瘤COal基因突变的分析 中文摘要 目的颅内海绵状血管瘤(简称ICcA)为中枢神经系统隐匿性血管畸形的一种， 临床上可见散发性和家族性两类。后者在拉丁美洲及西班牙裔人群中多见。国外 研究已证实ICCA是一种神经系统遗传性疾病，位于7q11．2～22的CCMl基因的 突变使其编码的KRITl蛋白功能改变或缺失是导致家族性ICCA发病的重要原因。 但ICCA的家族性存在着明显的民族和地域差异。除拉丁美洲及西班牙裔人群外， 其他民族和地域的人群中则较为少见。对中国患者，家族性ICCA的报道更为罕 见。因此，在中国人群来说，ICCA的发病是否具有上述的遗传机制，即是否与 CCMl基因突变有关?其突变位点与国外有何差异?目前国内外尚无有关报道。 同时，文献报道的CCMl基因突变均由家族性ICCA患者中检测出。CCMl基因与 同?这些问题均有必要进一步研究。为此我们收集21名ICCA患者及15名正常 况进行对照分析。而目前发现的CCMl基因突变中有83．3％集中于这9个外显子。 目的在于明确：①ICCA中国患者CCMl基因有无突变、突变的位点和性质、有无 新的突变位点及分析CCMl基因的突变与ICCA发病的关系。②研究散发性ICCA 的患者cCm基因突变的情况进行比较。 方法收集复旦大学附属华山医院神经外科自2002年6月至2003年2月手术 21例。其中男性13例，女性8例；单发16例，多发5 并经病理证实的ICCA Nagel 例(15个病灶)；所有病例均详细询问直系亲属三代以内的病史，按^Gil 制定的ICCA患病可能性判断标准对家族每一个成员进行ICCA可能性的判定， 15例。选择15例正常健康人作对照。 6例，SICCA 2l例ICCA中，可能为FICCA l、12、 采集研究对象的外周静脉血进行DNA抽提、PCR扩增CCMl基因第8、9、I PRISM 377型荧光自动测 13、15、16、17、18外显子、PCR产物纯化及利用ABI 并与GeneBank比较。 结果检测CCMI基因8号外显子，发现l例患者704insT移码突变，在密码子 颅内海绵状血管瘤cc¨I基因突变的分析 中文摘要 第246位出现终止密码子TAA，使肽链合成提前终止。检测CCMI基因12号外显 氨酸变成苯丙氨酸。这5例中有4例同时发现在IVsl2～4c专T的内含子突变。另 I例除上述2种突变外，还有I 氨基酸由谷氨酰胺变成脯氨酸。检测CCMI基因13号外显子，发现2例患者 1405A-C错义突变，使编码KRITI蛋白第469位氨基酸由天冬酰胺变成组氨酸。 基因18号外显子，发现l例患者2138insG移码突变，在密码子第733位出现终 止密码子TGA，使肽链合成提前终止。上述所有突变均为首次发现。其余患者及 正常对照组检测结果无异常。6例FICCA中有5例存在CCMl基因突变，突变率 有统计学差异(pO．05)。 结论 蛋白第246位出现终止密码子TAA，使肽链合成提前终止；第12号外显子存 在1 160A--C 氨酸，可能是中国患者CCMI基因突变的热点；第12号外显子存在I 的错义突变，导致KRITI蛋白第387位氨基酸由谷氨酰胺变成脯氮酸：第12 号外显子5’端的内含子存在IVSl2—4C-T的内含予突变：第13号外显子存 733位出现终止密码子TGA，使肽链合成提前终止。 2．中国ICCA患者的CCMI基因突变，可能是I