一种快速的leptin^ob和leptinr^db等位基因SNP分型方法.pdfVIP

2010年2月 中国比较医学杂志 February，2010 第 2O卷 第2期 CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVE MEDICINE V0l_2O No．2 一 种快速的leptin 和 leptinr等位基因SNP分型方法 胡培丽 ，王金恒 ，岳秉飞 (中国药品生物制 品检定所 ，北京 100050) 【摘要】 目的 建立 t 和 leptinr等位基因的SNP分型方法一单管双向等位基因专一性扩增 (single．tube bi-directionalallelespecificamplification，SB-ASA)，同时与传统的PCR．酶切法进行 比较分析。方法 用 PER．酶切 法和 SB-ASA方法 同时对 ob／+杂合小 鼠的7只后代小 鼠和 db／m的9只后代小 鼠进行 了检测分型。结果 两种 方法都成功地对 0b、db小鼠进行了分型，且结果完全一致。结论 成功建立了一种快速的leptin和 leptinr等位基 因的SNP分型方法 一SB-ASA，促进 了0b、db小 鼠的繁殖育种工作。 【关键词】 ob；db；SNP；单管双向等位基因专一性扩增；小鼠 【中图分类号】R·33 【文献标识码】A 【文章编号】1671．7856(2010)02-0054-04 A Rapid SNP GenotypeAssayfortheleptin。andleptinr曲Alleles HUPei—li，WANG Jin—heng，YUE Bing-fei (NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts，Beijing100050，China) A【bstract】 Objective ToestablisharapidSNPgenotypeassayfortheleptin andleptinralleles(single．tubebi． directionalallelespecificamplification (SB—ASA)，andcompareditwiththetraditionalmethodofPCR-restriction endonucleasedigestion．M ethods Seven andnineoffspringsofob／+ anddb／m heterozygousmice，respectively，were genotypedbyboth theSB-ASA andPCR-restriction endonucleasedigestion．Results Alltheoffspringsweresuccessfully genotypedbyboth thetwomethods，andtheresultswereidentica1．Conclusions A rapid SNP genotypeassayforthe 却tin andleptinr alleleshasbeensuccessfullyestablished．Itmayeffectivelypromotethebreedingworkofboththeob anddbmice． 【Keywords】 ob；db；SNP；single—tubebi．directionalallelespecificamplification；mouse 瘦素 (1eptin)是一种由167个氨基酸残基组成， 胖。ob／ob小鼠广泛应用于肥胖症和糖尿病研究， 分子质量 16000道尔顿的蛋 白质激素，主要在白色 是整个 Jackson实验室 中应用最多的肥胖动物模 脂肪细胞中表达 ，与细胞表面受体结合引发各种生 型，还广泛应用于营养学和药理学