兰州大尾羊微卫星DNA多态性研究.pdfVIP

遗传育种 ·GeneticsandBreeding 2011年 第47卷 第1期 兰州大尾羊微卫星DNA多态性研究 1 2 郎 侠 ，吕潇潇 （1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，甘肃兰州 730050； 2.甘肃农业大学动物科技学院，甘肃兰州 730070） 摘 要：研究旨在分析兰州大尾羊的微卫星DNA多态性，以期了解该品种的遗传多样性，为该品种保种选育和 品质的进一步提高提供资料。选择 15对微卫星引物，通过计算基因频率、多态性信息含量、有效等位基因数和杂 合度，评估其品种内的遗传变异。结果表明：在 15个座位中，共检测到153个等位基因，每个座位平均为10.2个等 位基因；座位平均杂合度为0.8149；平均有效等位基因数为6.0891；平均多态性信息含量为0.7762。结果提示，兰 州大尾羊群体存在丰富的遗传多样性，所选微卫星标记可用于绵羊遗传多样性评估。 关键词：微卫星；遗传多样性；兰州大尾羊 中图分类号：S826.2 文献标识码：B 文章编号：0258-7033（2011）01-0014-04 兰州大尾羊（Lanzhoulargetailedsheep）是我国 材料与方法 著名的地方绵羊品种之一，属于我国四大绵羊类 型中的长脂尾型，它是清朝同治年间（1862—1875） 1.1 实验材料 本实验采用典型群随机抽样法，采 由陕西大荔一带引进的同羊与兰州当地土种羊 集了36只兰州大尾羊的新鲜血样，EDTA抗凝。采 （蒙古羊）杂交选育而成，因其尾大、脂肪充实而著 样羊只均来自其中心产区，采样个体具有该品种的 [1] 明显特征。 称为兰州大尾羊 。据统计，1980年存栏约 1万只， 1986年存栏约 8000只，目前已不足 3000只，是 1.2 方法 我国绵羊数量最少的地方品种，按照动物遗传资 1.2.1 基因组 DNA提取 基因组 DNA提取参考 源评价标准,属于濒危品种。2006年 6月,农业部 《分子克隆实验指南》（第 3版）用蛋白酶K和苯酚 根据《畜牧法》第十二条的规定，(中华人民共和国 从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA的方法，稍 农业部公告第 662号)确定八眉猪等 138个畜禽 加改进，即58℃蛋白酶消化 1h。 品种为国家级畜禽遗传资源保护品种，兰州大尾 1.2.2 微卫星标记的选择 采用 FAO推荐微卫星 羊就在其列。过去对该品种的研究仅限于体形外 引物，共 15对（表 1）。由GenBank可查，并由大连宝 貌和生产性能等方面的调查和宏观描述，而对其种 生物公司合成。 质特性的深入研究则很少，仅对其血清淀粉酶酯酶 1.2.3 PCR反应条件 PCR反应体系为 20 L， 及苹果酸脱氢酶同工酶的多态性、血红蛋白多态 PCR扩增程序：94℃预变性 5min；94℃变性 30s， 性、染色体组型、转铁蛋白多态性随机扩增 DNA进 50~60℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延 [1-5] 伸 10min；4℃保存。 行了分析研究 ，但是，从分子标记的角度对兰州 大尾羊种质特性的研究几乎是空白。为对该品种 用 10%的非变性PAGE凝胶进行电泳，然后用 的种质和遗传特性等方面有比较深入的全面了