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第 卷 分析化学 （ ） 研究简报 第 期 31 FENXI HUAXUE 8 年 月 2003 8 Chine e JOurnaI Of AnaIyticaI Chemi try 992 ~ 995 3 种色谱模式联用在中药活性成分初步筛选中的应用 ! 毛希琴 邹汉法 封 顺 孔 亮 黄晓冬 厉 欣 罗权舟 （中国科学院大连化学物理研究所，国家色谱研究分析中心，大连 116021） 摘 要 提出了反相高效液相色谱（ ）、固定化脂质体色谱（ ）以及固定化载体蛋白色谱（ ）种 RP-HPLC ILC ICPC 3 色谱模式联用筛选中药中活性成分的新思路，并用于传统中药川芎中的生物活性成分的初步筛选。从川芎的 甲醇提取液中筛选出几种既有细胞膜的穿透能力又有与载体蛋白的结合能力的成分，并对其中两种主要的 组分进行了初步的结构鉴定。 关键词 液相色谱，固定化脂质体色谱，载体蛋白，中药，川芎，活性成分 1 引 言 药物与蛋白尤其是载体蛋白的结合能力以及药物的细胞膜的通透能力对药物在体内的运送、活性 或毒性的表达、代谢甚至排泄等过程起着至关重要的作用。因而考察化合物与载体蛋白及细胞膜的结 合能力对鉴定它是否具有生物活性有着非常重要的意义。以血浆中两种主要的载体蛋白———血清白蛋 ［］ 1 白和 酸性糖蛋白 为固定相的固定化载体蛋白色谱（ ），可以作为分子探针考察活性成分与载体 - ICPC ! ［］ 蛋白作用的强度2 ；而活性成分在以脂质体为固定相的固定化脂体色谱（ ）上的色谱保留则可以模拟 ILC ［，］ 活性成分与生物膜的相互作用，反映活性成分在细胞膜上的穿透能力3 4 。因此，将ILC 与ICPC 作为中 药活性成分初步筛选的工具，理论上有很好的可行性。 ［，］ 5 6 汪海林等已将ICPC 成功地用于中药活性成分的分离分析 ，而ILC 在这一领域的应用还未见报 道。本文提出这两种色谱方法与RP-HPLC 联用，用于川芎中活性成分的筛选，使得筛选结果与中药成 分活性表达的生理过程有更好的相关性。 2 实验部分 2 . 1 ILC 色谱柱和ICPC 色谱柱的制备 ［］ ［］ 3 7 磷脂涂敷法制备 固定相，具体方法参见文献 ； 固定相的方法参见文献 。 ILC ICPC 2 . 2 川芎甲醇提取物的制备 称取经粉碎过筛（ 粒径）的川芎粉末置入烧瓶内，加入适量甲醇（ 粉末），回流 ，提 0 .6 mm 5 mL/1 g 1 h 取液降温后经微孔滤膜（ ）过滤，冰箱保存，