富勒烯赖氨酸衍生物的合成及对AHH-1细胞的辐射防护效应.pdfVIP

第28卷 第 1期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vo1．28，No．1 2010年 2月 J．Radiat．Res．Radiat．Process． February2010 富勒烯赖氨酸衍生物 的合成及对 AHH．1细胞 的 辐射 防护效应 孙 权 黄越承 高 福 李百龙 崔建国 赵 芳 董俊瑞 蔡建明 (第二军医大学放射医学教研室 上海 200433) 摘要 本研究通过富勒烯与赖氨酸直接反应，合成了一种富勒烯赖氨酸衍生物 (C6o-Lys)，并通过元素分析、 红外光谱、H．NMR、¨C．NMR等对其分子结构进行了表征。细胞毒性研究发现C6旷Lys对人淋巴母细胞AHH．1 的毒性较小，在 1200mg／L浓度 以下的细胞存活率和未用药对照组相 比无明显差异。辐射生物效应研究发现 400mg／L以上C6旷Lys预处理能显著提高受照细胞的存活率，并降低辐射诱发的凋亡率，其辐射保护效应具有 明显的剂量依赖性。说明C60．Lys预处理对受4GyY射线照射的AHH．1细胞具有一定的保护作用。 关键词 富勒烯，辐射防护，y射线，AHH．1细胞，细胞凋亡 中图分类号 Q28，R811．5，Q256 富勒烯是由 60个碳原子组成的碳的第三种 同 素异构体，是 由Kroto等…于 1985年在激光蒸发石 1 材料与方法 墨的过程中首先发现的。富勒烯具有吸收大量 自由 1．1材料 基的能力和抗氧化特性2【J，有 “自由基海绵”之称。 而v射线对机体的间接损伤主要通过 自由基引起，由 1．1．1试剂和仪 器 主要试剂 ：富勒烯 C60 自由基清除剂寻找保护细胞辐射损伤药物，是 目前 (fullerene)购 自Aldrich公司。甲苯、赖氨酸、氢 探索新型辐射防护剂的重要途径。但富勒烯本身为 氧化钠、无水 乙醇等常规试剂均购 自中国国药集 团 非极性对称球形结构，水溶性低，影响了其生物学 公司。主要仪器 ：H．NMR(Bruker600MHz，GER)， 应用。目前解决其水溶性的方法主要通过水溶性基 ”C．NMR (Bruker600MHz，GER)，FTIR红外光 团的化学修饰，如添加羟基 引【、羧基 引【、氨基 【】等。 谱仪 (BrukerVector22型，GER)，R204B旋转蒸 这些水溶性的富勒烯衍生物除了保 留部分富勒烯 发器 (上海 申生科技有限公司)，COULTEREPICS 母体的特性外 ，还可 以获得添加分子的新的特 FC500型流式细胞仪(BackmanCoulter，USA)。Cell 性如生物毒性降低 ，生物效应增强等。有研究 CountingKit一8试剂盒购 白日本 同仁化学研究所 。 者报道富勒烯赖氨酸衍生物水溶性较好，并且具有 AnnexinV和 PI凋亡检测试剂盒购 自Bipec公司。 优 良的抗氧化功能6【]，而 自由基引起的氧化应激是 1．1．2 细胞培养 AHH．1细胞为来源于人淋巴母 电离辐射导致细胞损伤的重要途径，因此富勒烯赖 细胞系的建株细胞 (本实验室长期培养)。细胞培养 氨酸衍生物有可能对辐射诱发的损伤具有一定的防 条件：RMPI一1640培养基 (Hyclone公司)，10％NCS 护作用。 (GIBCO公司)，37℃，5％C02，饱和湿气，在细 本课 题合 成 了一种 富勒烯 赖氨 酸衍 生物 胞培养箱中孵育。 C6o_Lys，采用元素分析、核磁共振、红外光谱对其 1．1．3 Y射线照射条件 采用6。co放射治疗机 (上 进行了初